SOD人超氧化物歧化酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 返回列表頁

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
泊洛沙姆188有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in War別名: 聚醚英文名稱: Polyethylene-polypropylene glycol188

k-卡拉膠有效期: 3年級別: BR溶解性: 10mg/mL in war別名: 卡拉膠類型III Κ-角叉菜聚糖 角叉萊膠

丹磺酰有效期: 3年溶解性: 20mg/ml CHCL3別名: 丹磺酰 1-二甲氨基萘-5-磺酰英文名稱: Dansyl Chloride

大黃素有效期: 2年溶解性: 5mg/ml  EtOH別名: 朱砂蓮甲素英文名稱: Emodin

辣椒紅有效期: 3年別名: 辣椒紅素英文名稱: Capsanthin: 465-42-9

阿斯巴甜有效期: 3年溶解性: 80mg/mL War 別名: L-天冬氨酰-L-丙氨甲酯英文名稱: Aspartame

二水槲皮素有效期: 2年級別: 醫(yī)藥級溶解性: 10 mg/mL EtOH別名: 二水櫟精; 二水槲皮黃素; 櫟精二水合物

齊墩果別名: 土當(dāng)歸英文名稱: Oleanolic acid: 508-02-1分子式: C30H48O3
SOD人超氧化物歧化酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CD19/FITC  熒光素標(biāo)記CD19抗體IgG微管蛋白β輔助因子D抗體2,4-二-5-嘧Mouse PLA2G2D (Phospholipase A2, Group IID) ELISA Kit

Phospho-CD19 (Tyr531) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化CD19抗體IgG鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體2,4-二-5-嘧Mouse cPLA2 (Phospholipase A2, Cytosolic) ELISA Kit

CD19/PE  熒光素PE標(biāo)記CD19抗體IgG有絲分裂蛋白BUB3抗體2,4-二-5-嘧Mouse iPLA2 (Phospholipase A2, Calcium Independent ) ELISA Kit

CD20/FITC  熒光素標(biāo)記CD20抗體IgGp60TRP蛋白抗體2-聯(lián)苯Mouse SAA2 (Serum Amyloid A2) ELISA Kit

CD20/Biotin  生物素化CD20抗體IgG博萊霉素水解酶抗體2-聯(lián)苯Mouse  RTN4 (Reticulon 4) ELISA Kit

CD20/MS4A1/PE  熒光素PE標(biāo)記CD20抗體IgG短蛋白聚糖抗體5-溴-2--3-甲基吡Mouse ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit

CD25/IL-2RA /PE-Cy5  熒光素PE-Cy5標(biāo)記兔抗人、大、鼠白介素2受體a鏈抗體IgGBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體5-溴-2--3-甲基吡Mouse βMSH (beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit

CD22/FITC  熒光素標(biāo)記抗白分化抗原CD22抗體IgG巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體3-巰基甲酯Mouse Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)