LIF人白血病抑制因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 返回列表頁(yè)

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人心肌裂解物HCML

XRCC5 & XRCC6 Others Human 人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 桿狀病-昆蟲(chóng)裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NIH:OVCAR-3，卵巢癌 人食管癌,KYSR450 豚鼠皮膚;GP-S2

tTA基因修飾的鼠畸胎瘤(B類(lèi));F9-CAG-tTA-3A1

鼠癌;CCC-Ca761-03

FABPB  腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體規(guī)格： 0.2ml

factor V  凝血因子5抗體規(guī)格： 0.2ml

factor VIII(FVIII) human  第八因子相關(guān)抗原抗體規(guī)格： 0.1ml

factor VIII(FVIII)  第八因子相關(guān)抗原抗體規(guī)格： 0.1ml

factor XIII  凝血因子13抗體規(guī)格： 0.2ml

Leupeptin分子式：C20H38N6O4分子量：426.55

Levistilide A分子式：C24H28O4分子量：380

LGlutamic acid 1tertButyl ester hydrochloride分子式：C9H18CLNO4分子量：239.7

LGlutamic acid 1tertButyl ester hydrochloride分子式：C9H18CLNO4分子量：239.7

LGlutamic acid 1tertButyl ester hydrochloride分子式：C9H18CLNO4分子量：239.7

LGlutamic acid 5cyclohexyl ester分子式：C11H19NO4分子量：229.27

LGlutamic acid 5cyclohexyl ester分子式：C11H19NO4分子量：229.27

LGlutamic acid 5methyl ester分子式：C6H11NO4分子量：161.16

LGlutamic acid 5methyl ester分子式：C6H11NO4分子量：161.16

Lglutamic acid pnitroanilide分子式：C11H13N3O5分子量：267.24

Lglutamic acid pnitroanilide分子式：C11H13N3O5分子量：267.24

LGlutamine分子式：C5H10N2O3分子量：146.14

LGlutamine分子式：C5H10N2O3分子量：146.14

LGlutamine分子式：C5H10N2O3分子量：146.14

LHistidine分子式：C6H9N3O2分子量：155.15

LHistidine分子式：C6H9N3O2分子量：155.15

LHistidine分子式：C6H9N3O2分子量：155.15

LHistidine分子式：C6H9N3O2分子量：155.15

LHistidine分子式：C6H9N3O2分子量：155.15

LHistidine分子式：C6H9N3O2分子量：155.15

脂聯(lián)素(ADP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： ADP ELISA Kit

脂酰肌抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA檢測(cè)試劑盒humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 96T/48T

丙氨氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Alanine aminoansferase,ALT ELISA Kit

CLIAKitfoIMP-3(Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase3)ELISAKit基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3規(guī)格：48T/96T

全組織免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB*間接檢測(cè)試劑盒(含一抗和HRP二抗)10次

ELISAKitASCA抗釀酒酵母抗體規(guī)格：48T/96T

犬雙氫睪(DHT)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

山羊肝脂酶(HL)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat hepatic lipase,HL ELISA Kit

腦鈉素(BNP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： BNP ELISA Kit

Rat5-Hydroxyyptamine,5HT酶聯(lián)免疫試劑盒5羥色(5-HT)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRP酶聯(lián)免疫試劑盒降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit高分子量角蛋白(CK-HMW)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
LIF人白血病抑制因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框204抗體2-溴-4'-苯乙Porcine RAG-1 (Recombination Activating Gene 1) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框206抗體4--α-甲基芐胺Porcine MCP/CD46 (Membrane Cofactor Protein) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框211抗體對(duì)苯甲酰Porcine GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框225抗體對(duì)苯甲酰Porcine NRG-3 (Neuregulin 3) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體對(duì)苯甲酰Porcine TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框35抗體3-苯甲Porcine NPY (Neuropeptide Y) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體3-苯甲Porcine TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體3-苯甲Porcine ATF-5 (Activating Tranion Factor 5) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)