E2人雌二醇ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

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公司“質量是企業是生命之源”，選購優勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等

ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Streptomyces kanamyceticus 卡納霉素鏈霉菌Streptomyces kanamyceticus凍干物安全等級:1Type strain; Produces kanamycin高氏合成一號瓊脂：可溶性淀 20.0 g,KNO3 1.0 g,K2HPO4 0.5 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,NaCl 0.5 g,FeSO4 0.01 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.2-7.4。121℃，15min。生長條件:25-28℃，好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Hydrocarboniphaga│daqingensis 大慶食烴菌Hydrocarboniphaga│daqingensis分離基物:凍干物安全等級:1模式菌株:7生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Pelagibacrium│halotolerans 耐鹽海桿菌Pelagibacrium│halotolerans分離基物:海凍干物安全等級:1模式菌株:223生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus atrophaeus 深褐芽孢桿菌Bacillus atrophaeus凍干管，斜面培養物安全等級:1模式菌株:no熱空氣消控制生物學指標；產生L-desoxynojirimycin營養肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃，15min。傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌或培養基:充分溶解，平板涂布，活化培養。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養。生長條件:30℃，好氧。存儲條件:2-8℃冷藏 純度：≥98%

Trichophyton mentagrophys 須癬毛癬菌（斜面）Trichophyton mentagrophys斜面安全等級:2模式菌株:no綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧 純度：97%

Lactobacillus│ 乳菌Lactobacillus│凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0002生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度：98%

Lactobacillus gasseri 格氏乳桿菌Lactobacillus gasseri凍干物安全等級:1模式菌株:no微生態制劑MRS培養基:酪胨 10.0g，牛肉 8.0g，酵母 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，鎂 0.2 g，鈉 5.0 g，檸檬三銨 2.0 g，磷氫二鉀 2.0 g，錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長條件:37℃，微好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Pectobacrium carotovorum 胡蘿卜軟腐病堅固桿菌Pectobacrium carotovorum凍干物安全等級:1模式菌株:no營養肉汁瓊脂 ：蛋白胨 10.0 g，牛肉提取物 3.0 g，NaCl 5.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾 1.0 L，pH 7.0生長條件:30℃，好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度：98%
E2人雌二醇ELISA試劑盒實驗原理Mast Cell Tryptase  肥大蛋白酶7抗體乙酰半胱氨3-(3,4-二甲氧基苯)Human PGDS (Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit

TPSB2  肥大類胰蛋白酶β2N-乙酰-L-酪氨3-噻吩二Human EP2 (Prostaglandin E Receptor 2 ) ELISA Kit  

MC-1R  黑皮質素-1受體抗體L-鹽賴氨3-噻吩二Human EP3 (Prostaglandin E Receptor 3) ELISA Kit  

MCSF Receptor  巨噬集落激因子受體抗體三磷腺苷二鈉乙酰溴-α-D-葡萄糖甲酯Human PGF (Prostaglandin F) ELISA Kit

phosphoM-CSF Receptor(Tyr546)  磷化巨噬集落激因子受體抗體胞磷膽鈉3-氨基苯頻吶酯Human PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit

phospho CSF1R (Tyr699)  磷化巨噬集落激因子受體抗體苯氨3-氨基苯頻吶酯Human FP (Prostaglandin F Receptor) ELISA Kit  

phospho-M-CSF Receptor(Tyr708)  磷化巨噬集落激因子受體抗體L-脯氨3,3'-二羥基二苯二硫Human PTGIS (Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit

phospho-CSF1R (Tyr723)  磷化巨噬集落激因子受體抗體氨3,3'-二羥基二苯二硫Human PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2) ELISA Kit