當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TCT-1人心肌營養(yǎng)素ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | CT-1人心肌營養(yǎng)素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human cardiotrophln 1, CT-1 Elisa Kit |
貨號 | FS-H64032 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
AntiNaVBeta4 (extracellular) NaVBeta4 (胞外)抗體(50 ul)
AntiNaVBeta4 (extracellular) NaVBeta4 (胞外)抗體(0.2 ml)
AntiNaVbeta2 NaVbeta2抗體(50 ul)
AntiNaVbeta2 NaVbeta2抗體(25 ul)
AntiNaVbeta2 NaVbeta2抗體(0.2 ml)
AntiNaVBeta1 (extracellular) NaVBeta1 (胞外)抗體(50 ul)
AntiNaVBeta1 (extracellular) NaVBeta1 (胞外)抗體(25 ul)
AntiNaVBeta1 (extracellular) NaVBeta1 (胞外)抗體(0.2 ml)
AntiNaV1.9 NaV1.9抗體(50 ul)
AntiNaV1.9 NaV1.9抗體(50 ul)
FAM135B FAM135B蛋白抗體 * 0.2ml Bis(2ethylhexyl) sebacate
FAM166A FAM166A蛋白抗體 * 0.2ml 1,4Butanediol
HIDE1/C19orfC38 19號染色體開放閱讀框38抗體 * 0.2ml (±)1,2,4Butanetriol
HIG1/HIGD1A 缺氧誘導基因1蛋白抗體 * 0.2ml Methyl decanoate
HIP1R/HIP12/HIP3 亨頓舞蹈癥相互作用蛋白12抗體 * 0.2ml Methyl laurate
HMBS/PBGD 卟膽原脫酶抗體 * 0.2ml Methyl palmitate
HN1/ARM2 雄激素調節(jié)蛋白2抗體 * 0.2ml Methyl salicylate
HN1L 雄激素調節(jié)樣蛋白抗體 * 0.2ml Methyl oleate
胰島素降解酶(IDE)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: IDE ELISA Kit
抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA檢測試劑盒Humanai-chromosomeaibodyELISAKit 96T/48T
α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierferon α,IFN-α ELISA Kit
CLIAKitforSt-Ag(HumanSalmonellatyphiaigen)ELISAKit傷寒抗原規(guī)格:48T/96T
血液C-反應蛋白(C-RP)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitai-Q-Ab抗Q熱抗體規(guī)格:48T/96T
α2纖溶酶抑制物(α2-PI)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 10,IL-10 ELISA Kit
熱休克蛋白72(HSP72)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: HSP72 ELISA Kit
PROG酶聯(lián)免疫試劑盒魚孕激素/孕同規(guī)格:96T/48T
Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNA酶聯(lián)免疫試劑盒抗膜DNA抗體(cmDNA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanBigEndothelin,BigEISAKit大內皮素(BigET)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
CT-1人心肌營養(yǎng)素ELISA試劑盒實驗原理DIO2/FITC 熒光素標記脫酶2抗體IgG碳酐酶9抗體6-氨基煙Rat EGF (Epidermal Growth Factor) ELISA Kit
DISC1(CT)/FITC 熒光素標記DISC1 C端抗體IgG色素P450 17抗體6-氨基煙Rat ENA-78 (Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit
DISC1(NT)/FITC 熒光素標記DISC1 N端抗體IgG色素P450 7A1抗體/膽固7a羥化酶4-甲氧基-3-甲Rat P1 (Caspase 1) ELISA Kit
DJ-1/FITC 熒光素標記絲裂原依賴性癌基因蛋白抗體IgG膽固24羥化酶抗體4-甲氧基-3-甲Rat ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit
DKK1/FITC 熒光素標記抑癌蛋白DKK1抗體IgG腫瘤新因子1抗體4-甲氧基-3-甲Rat FAS/CD95 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit
DKK3/FITC 熒光素標記抑癌蛋白DKK3抗體IgG膽固25α7羥化酶抗體2,5-二噻吩Rat ACS (Fatty Acyl-CoA synthetase) ELISA Kit
KMT6/EZH2/FITC 熒光素標記抑癌蛋白EZH2抗體IgG角蛋白3+12抗體2,5-二噻吩Rat Fga (Fibrinogen Alpha) ELISA Kit
DLK1/FITC 熒光素標記穿膜蛋白DLK1抗體IgG接頭蛋白CrkL抗體4'-溴-3-苯Rat FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit
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