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    當前位置:上海撫生實業有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 頸動脈平滑肌細胞

    頸動脈平滑肌細胞

    參  考  價面議
    具體成交價以合同協議為準

    產品型號

    品       牌其他品牌

    廠商性質經銷商

    所  在  地上海市

    更新時間:2022-04-18 12:15:33瀏覽次數:131次

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    產地 國產 加工定制
    適用領域 科研 貨號 FS-01X9778
    頸動脈平滑肌細胞公司正在出售的產品:牙周膜成纖維細胞cDNA 英文名稱:HPLF cDNA 規格:20 reactions
    食道上皮細胞cDNA 英文名稱:HEEpiC cDNA 規格:20 reactions
    食道平滑肌細胞cDNA 英文名稱:HESMC cDNA 規格:20 reactions
    腸微血管內皮細胞cDNA 英文名稱:HIMEC cDNA 規格:20 reactions

    產品屬于:

    產品名稱:頸動脈平滑肌細胞    

    產品規格:5×105

    貨號:FS-01X9778

    產品類型:原代細胞

    單位:T25/瓶

    提供細胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報告

    保存培養溫度(℃):37

    運輸溫度(℃):常溫

     

       

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    細胞培養的優點:

    1.研究的對象是活細胞

    在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

    2.研究條件可以人為控制

    pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

    3.研究的樣本可以達到比較均一性

    通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

    4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

    采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

    細胞培養操作規程:

    一.培養基及培養凍存條件準備:

    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

    二.細胞處理:

    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    注意事項:

    1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

    2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

    3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

    4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

    5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

    6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

    7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

    實驗報告:

    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

    二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    人鳥解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Guanine nucleotide dissociation Inhibitor,GDI ELISA Kit規格:96T/48T

    人八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 英文名稱:Human octamer transcription factor 2B,OTF2B ELISA Kit規格:96T/48T

    人八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 英文名稱:Human octamer transcription factor 2A,OTF2A ELISA Kit規格:96T/48T

    人脫氧尿三磷(DUTP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human deoxyuridinetriphate,DUTP ELISA Kit規格:96T/48T

    人協同刺激分子受體(CMR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISA Kit規格:96T/48T

    人聚糖(PG)ELISA試劑盒 英文名稱:Human peptidoglycan,PG ELISA Kit規格:96T/48T

    人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Lipoarabinomannan,LAM ELISA Kit規格:96T/48T

    人未甲基化寡聚脫氧核(CpG-ODN)ELISA試劑盒 英文名稱:Human CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISA Kit規格:96T/48T

    ICE蛋白激活因子(IRAP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISA Kit規格:96T/48T

    人非甲基化寡核(NON)ELISA試劑盒 英文名稱:Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA Kit規格:96T/48T

    人蛋白Z(Protein Z)ELISA試劑盒英文名稱:Human Protein Z ELISA Kit規格:96T/48T

    人蛋白S(Protein S)ELISA試劑盒英文名稱:Human Protein S ELISA Kit規格:96T/48T

    人可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒英文名稱:Human soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit規格:96T/48T

    CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒英文名稱:Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA Kit 規格:96T/48T

    CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒英文名稱:Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA Kit規格:96T/48T

    CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒英文名稱:Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA Kit 規格:96T/48T

    人基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒英文名稱:Human lumican,LUM ELISA Kit規格:96T/48T

    Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit規格:96T/48T
    頸動脈平滑肌細胞Aggrecan1  軟骨蛋白聚糖抗體規格: 0.1ml

    phospho-ANAPC1 (Ser355)  磷化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體規格: 0.1ml

    DAD1  細胞死亡防衛蛋白1抗體規格: 0.2ml

    TCERG1/CA150  轉錄延伸調節蛋白1抗體規格: 0.1ml

    CAB39L  鈣結合蛋白樣39抗體規格: 0.2ml

    Aggrecanase-2/ADAMTS-5  軟骨蛋白聚糖抗體規格: 0.1ml

    CAGE1/CT3/CT95  腫瘤/睪丸抗原3抗體規格: 0.2ml

    CD66d/CEAM3  癌胚抗原相關細胞粘附分子3抗體規格: 0.2ml


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