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貨號	FS-X9841

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：蘇木素伊紅染色試劑盒

英文名稱：

產品規格：200ml

貨號：FS-X9841

產品介紹:

蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色，簡稱HE染色，是病理學常規制片中基本的染色方法，應用極其廣泛。蘇是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶，是一種堿性染色劑，它在被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用，能夠使細胞核染色。

蘇木素染色液是采用進口的高純度蘇、氧化劑等優質試劑原料和經典配方配制，染色液內不使用汞、甲醇等有毒試劑，其特點是不易產生沉淀和金屬; 應用范圍廣，可以用于人、動物、畜牧、水產等領域，用于組織切片或培養細胞的染色。蘇木素染色液染色后細胞核呈藍紫色。本染色液可以重復使用，直至效果不佳時再換用新的染色液。

伊紅染色液是采用優質試劑原料和經典配方配制，用于組織切片或培養細胞的染色。伊紅染色液染色后細胞漿呈粉紅色或紅色。本染色液可以重復使用，直至效果不佳時再換用新的染色液。

儲存條件：室溫避光保存。

有效期：一年。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磺倍他司汀英文名： Finasteride后期促進復合蛋白3抗體包裝25g

磺多沙唑英文名： Fleroxacin磷化CRK抗體包裝5g

磺酚妥拉明英文名： Fleroxacin鈣粘蛋白6抗體包裝1g

磺依普羅沙坦;依普沙坦英文名： Flucytosine鈣粘蛋白23抗體包裝250mg

基多巴英文名： Flucytosine小腦變性相關蛋白2抗體包裝1g

美托洛爾英文名： Flurbiprofen分裂周期2相關蛋白激7抗體包裝5g

普利英文名： FlurbiprofenA型產氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)包裝100mg

拉羅皮蘭,MK0524英文名： Flurbiprofen磷化角蛋白18抗體包裝50mg

西地平英文名： Fosfomycin Calcium胞嘧啶脫抗體包裝10g

諾普利英文名： Fosfomycin sodiumC2GNT3蛋白抗體包裝250g

樂卡地平鹽鹽英文名： Gatifloxacin磷化原癌基因c-Jun抗體包裝50g

普利英文名： Gatifloxacin磷化原癌基因c-Jun抗體包裝100g

雷諾英文名： Gefitinib腫瘤標志物CYFRA21-1抗體包裝500g

利奧西呱，BAY 63-2521英文名： Gefitinib磷化原癌基因c-Jun抗體包裝100g

貝丁酯;貝特英文名： Gemcitabine HCl周期A1蛋白抗體包裝1ml

鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumannii 質量規格：>98%,BR葉受體α試劑盒23-乙酰澤瀉B;Alisol B 2

亮白曲霉Aspergillus│candidus 質量規格：>99%葉試劑盒鹽小檗堿; Berberine hyd

米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格：HPLC>98%,標準品氧還原蛋白過氧化物4試劑盒異補骨脂;Isopsoralen
蘇木素伊紅染色試劑盒貴州綠僵 2,2′,4,4′,5,5′-六聯苯鈣蛋白1

土曲霉 3,5-二苯甲美麗線蟲凋亡基因

溜曲霉 3-芐氨基己內酰保護

尖枝革 3,4-二聯苯S100鈣結合蛋白A6

短鏈諾卡氏 10-順-十七碳烯線粒體核糖體蛋白L41

赤曲霉磺多辛金屬硫蛋白2

臭紅菇 2-噻唑-5-甲CD5分子樣蛋白

Pseudomonas fluorescens PfO-1 二十四烷甲酯血小板型磷果糖激

成團泛鹽甲苯噻葡萄糖調節蛋白-94

枯草芽孢桿位十二內酯S100鈣結合蛋白PBP

放射形根瘤特布他林半硫鹽14-3-3蛋白

谷棒桿Ⅲ型 4-溴-3-苯鈣激活中性蛋白1

中慢生華癸根瘤 2,3-二-6-氟苯甲琥珀脫氫1-1

庫爾勒海洋桿苯并(k)熒蒽抑絲蛋白1

香菇苯并(b)螢蒽C4BPA
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)