多胺氧化酶(PAO)測試盒比色法活性計算

測定原理：

PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫，在過氧化物酶存在的條件下與底物顯色，在550nm下有特征吸收峰，通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。

PAO活性計算：

1、按樣本蛋白濃度計算：

單位定義：每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO（U/mg prot）＝ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.001÷T =333.33×ΔA÷Cpr

2、按樣本鮮重計算：

單位定義：每g組織在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷W

3、按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：

單位定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO（U/104 cell）＝ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.001÷T =0.667×ΔA

4. 按液體體積計算

單位的定義：每mL液體樣本在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO（U/mL）=ΔA×V反總÷V樣÷0.001÷T =333.33×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；V樣：加入樣本體積，0.02 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。