熒光定量PCR擴增曲線四個時期

時間：2023/8/7閱讀：1175

擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，以循環數為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。

理論上PCR過程中反應產物是以指數增長的，但隨著PCR循環數的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反應副產物阻礙反應等原因，致使PCR的擴增效率降低，產物生成的速度逐漸減緩，因此擴增曲線是一條“S形"曲線。

擴增曲線可以分成四個時期：基線期，指數期，線性期，平臺期。

基線期：擴增曲線的水平部分，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物生成量的變化。

指數期：PCR指數擴增期，擴增曲線起峰，每個循環的產物量與初始模板量符合指數關系，PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系。

線性期：PCR反應后期，由于PCR反應體系各成分的消耗、產物抑制等因素的影響，反應效率降低，產物量與初始模板量不再符合指數關系。

平臺期：PCR反應停止，PCR產物不再隨循環數增加而增加。由于影響PCR擴增的因素錯綜復雜，每個反應進入平臺期的時間和平臺期的高低都各不相同。

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