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大鼠elisa試劑盒操作過程:
1.運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,避免加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的誤差。
2.依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自己的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3.參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。立即參加50ul的生物素符號(hào)的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5.每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7.每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標(biāo)板,迅速參加50ul終止液,參加終止液后應(yīng)立即測(cè)定成果。
9.在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
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