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    摘要本標準中的“微生物”是指具有細胞結構的微生物,如細菌、真菌、藻類和原生動物等。本標準規定了測定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物發光法。

      【儀表網 行業標準上海市凈水技術學會發布了團體標準《水中微生物含量的測定 三磷酸腺苷(ATP)生物發光法》征求意見稿,現予征求意見。意見反饋郵箱:50706127@qq.com。
     
      為貫徹《關于加強城市供水安全保障工作的通知》(建辦城〔2022〕41 號),提高供水突發污染應對能力,加強水廠精細化管理,保障供水生物安全,規范水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的測定,為《上海市城市總體規劃(2017-2035 年)報告》中“全市供水水質達到國際先進標準,滿足直飲需求”提供技術支撐,編制組經廣泛調查研究,并在充分征求意見的基礎上,制定本標準。
     
      本標準參照 GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第 1 部分:標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。
     
      本標準起草單位:上海浦東水務(集團)有限公司、東方國際集團上海環境科技有限公司、上海南匯自來水有限公司、哈希水質分析儀器(上海)有限公司、同濟大學、天津泰達水業有限公司、上海青浦自來水有限公司、上海市松江自來水有限公司、上海市自來水奉賢有限公司、沈陽水務水質檢測技術發展有限公司、衡陽市清源水質檢測有限公司、廈門理工學院、廈門市水資源利用與保護重點實驗室、昆山市自來水集團有限公司。
     
      本標準中的“微生物”是指具有細胞結構的微生物,如細菌、真菌、藻類和原生動物等。本標準規定了測定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物發光法。
     
      本標準適用于以水為基質的樣品,包括地表水、水源水、工藝過程水、生活飲用水、直飲水和瓶裝水等。
     
      當制備試樣的樣品體積為50mL 時,方法檢出限為0.17pg/mL,測定下限為0.68pg/mL。本標準不適用于溶解性總固體>10000mg/L 的水樣,也不適用于含高濃度有機物、重金屬等干擾物質的水樣。
     
      方法原理:
     
      ATP 是高等植物細胞、高等動物細胞和微生物細胞的主要組成部分,通過測定活性細胞內的 ATP 濃度,可以快速反映水中活性微生物的含量。測定過程中,ATP 和熒光素、熒光素酶等快速反應產生光,經由 ATP 標準物質校準的光度計測定 RLU,根據公式計算最終得到 ATP 濃度。
     
      儀器和設備:
     
      不應將一次性耗材經高壓滅菌后重復使用,不應使用含有熒光物質的記號筆。
     
      1.光度計:使用光電倍增管,波長范圍至少覆蓋530±20nm,測量結果為 RLU。
     
      2.微量移液器:固定式100μL 和1000μL,可調式100~1000μL。
     
      3.高壓蒸汽滅菌器:121 ℃可調,用于實驗用水等的滅菌。
     
      4.干熱滅菌器:160 ℃~180 ℃可調,用于玻璃采樣容器和無菌瓶等的滅菌。
     
      5.采樣容器:帶螺旋蓋的無菌瓶或無菌袋,容積>100mL,玻璃、PP和 HDPE 等材質。
     
      6.注射器:容積刻度≥50mL,具活塞,無針頭,魯爾接口,PP 材質,無菌獨立包裝,一次性使用。
     
      7.測光管:尺寸和光度計(6.1)適配,PP 材質,無菌包裝,一次性使用。
     
      8.測光管架:尺寸和測光管(6.7)適配。
     
      9.微量移液器吸頭:200 μL 和 1000 μL,與微量移液器(6.2)適配,PP 材質,必須為無菌原盒包裝,一次性使用。
     
      10.針頭過濾器:濾盤直徑≤35 mm,孔徑 0.45 μm,魯爾接口與注射器(6.6)適配,水系混合纖維素酯(MCE)、玻璃纖維等材質,無菌包裝,一次性使用。
     
      11.實驗室常用儀器、設備和器材。
     
      實驗環境:
     
      操作人員應佩戴個人防護用品(7.1~7.3),對實驗桌面和儀器進行表面消毒(7.4),減少環境對實驗全過程的污染。無菌室不是必須的。
     
      質量保證和質量控制:
     
      1.空白實驗
     
      每批(或20個)樣品應對1個空白試樣(9.4)進行全程序空白實驗,測定結果應<方法檢出限。
     
      2.單點校準
     
      完成當日所有試樣測定后,宜進行一次單點校準,評估當日測定數據的有效性。
     
      詳情請見附件。

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