接種操作前的滅菌方法與操作步驟！
接種操作前的滅菌方法與操作步驟！
一、持接種環的手勢
以拿筆或毛筆的手勢持接種環環柄，以手指固定住接種環柄，一手指和手腕的轉動來控制接種環的運動。
二、接種環的灼燒
1、如果接種環上沾有液體或細菌，先將接種環的頭靠近火焰外焰但不要深入，要先將環上液體烤干，這樣做是為了防止液滴瞬間溫度升高飛濺污染周圍環境。
2、一般用右手豎直持接種柄（這里提到的接種柄是金屬材質，外面套有一段硬質耐熱型塑料或膠皮的手持部分），將接種環前段的圓環在火焰外焰中燒紅。
3、將接種柄略微傾斜，向左下方刺去，將接種環前段的金屬絲從頭至基部緩慢通過外焰至*燒紅。燒紅時需要注意接種環金屬絲不要碰到桌面，切不要灼燒手握的位置。
4、繼續向左下方移動，慢慢調整角度，將接種柄在外焰上進行灼燒。接種環沿原路返回，來回往復灼燒幾次。
5、將金屬絲與接種柄的連接處，用酒精外焰灼燒滅菌。這個連接處由于螺絲紋路較多，表面并非平整光滑， 容易留存微生物，并且在接種操作中，這個部位一般都進入試管或平皿內，所以這個位置的灼燒非常重要。
6、連接處灼燒完以后，后再將金屬絲和接種環燒紅一次，退出火焰。
三、持平皿手勢
平皿的拿法分兩種：手指托法和手掌托法。
手指托法將平皿置于左手中指、無名指和小指上，然后左手食指和拇指分別扣住平皿的邊緣，用左手拇指開啟平皿蓋。手指托法適用于操作人員手比較大的情況。由于靠食指和拇指控制平皿蓋。因此開合平皿十分靈活。
手掌托法將平皿置于左手手掌上，左手食指、中指、無名指和小指的關節扣住平皿底的邊緣。然后用左手拇指將平皿蓋向上頂開。這種持平皿的方法適用于操作人員手比較小的情況。但是由于只靠拇指來開合平皿，因此平皿開口無法開的很大。
以上兩種持平皿的姿勢只是針對直徑9cm以下的平皿而言，對于更大直徑的平皿，例如直徑14cm的平皿。無法用一只手完成持平皿并開合的動作，需要將平皿放在與酒精燈火焰等高的平臺上。然后用左手開合平皿。
四、移液管的使用
使用移液管時，嚴格禁止用口吸取液體。口吸液體會將待移取液體中的病原體吸到口中，十分危險。許多與實驗室有關的感染都是經口吸入和食入危險性物質所造成的。口吸液體還會污染操作對象。盡管移液管末端塞有棉花，但是棉花塞并不能有效的過濾微生物。感染性顆粒仍有可能通過它被吸入，當棉花塞塞的很緊時，吸取的時候可能要更用力，反而會導致棉花塞、氣溶膠甚至液體被吸出。所以一定要用吸耳球或機械吸氣裝置進行吸取液體和液體轉接的操作。以吸耳球為例具體介紹移液管的移液操作，具體操作如圖。
1、點燃酒精燈。將盛有待移取液體的容器置于酒精燈火焰周圍10cm的距離以內，打開容器。左手持已滅菌的移液管接近頂部的位置，左手拇指、中指和左左手無名指拿住一根已滅菌的移液管，左手食指自然打開，左手食指要處于其指肚能觸及移液管頂端的距離范圍內。將移液管迅速插入容器液面以下，但不要觸及容器底部，右手持捏扁的吸耳球抵在移液管頂部開始吸取液體，控制吸耳球膨脹的速度，防止速度過快引起液體噴出。吸取液體的體積要大于所需的體積。拿開吸耳球，左手食指指肚迅速蓋在移液頂端，用力程度以管內液體不流動即可。
2、將移液管豎直拿好，微微調節左手食指，使移液管內液面緩緩下降至所需的液體體積。注意以液面的凹面低處為準。
3、右手取來盛液體的容器（如試管）。將移液管前端貼目標容器壁。松開左手食指移液管內液體自然流入容器內。
五、移液器的使用
由于移液管使用不便且容易造成污染。因此在有條件的實驗室通常使用移液器來移取液體。
移液器規范使用的重要性無論怎么強調都不過分。移液器的使用需要注意：移液器在用完之后，一定要調回至大量程處，避免移液器內各組件長時間處于彈力壓縮狀態，影響移液器的精準程度，造成移液器使用壽命縮短甚至損壞；不管設定的液體體積是多少，通常移液器的按鈕有兩檔，吸液時按到檔，排液時按到底（第二檔）；在酒精燈火焰附近操作時避免火焰灼燒到移液器槍桿。移取液體后需保持槍頭向下。不得傾斜槍體導致液體倒流；移液器槍體內部存在污染（除非是已滅菌的可滅菌移液器），用于接種時需引起注意。
六、火焰灼燒涂布棒
涂布棒在進行平板涂布操作之前，需要經過火焰灼燒滅菌。具體操作見下圖。
1、將涂布棒彎頭的一端浸入酒精，注意不可浸入的太深，手持部分不可浸入或沾上酒精。
2、將涂布棒取出，至酒精不再下滴的時候置于酒精燈的外焰進行灼燒。注意蘸后不要過度傾斜涂布棒防止酒精沿涂布棒的柄倒流引燃到手。
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