參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：諾如病毒GⅠ型檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）
產(chǎn)品貨號(hào)：YS-P013879
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
豚鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG) 腺苷-3′,5′-環(huán)單磷酸 三羥氨烷鹽 酪氨酸酶相關(guān)蛋白1抗體
豚鼠不均一核糖核蛋白U (HNRPU)腺苷 2′(3′)-單磷酸混合異構(gòu)體 推定NFκB激活蛋白20抗體
豚鼠蛋白激酶C-θ(PKCθ)腺苷5'-二磷酸核糖鈉Src激活和信號(hào)分子蛋白抗體
豚鼠白血病抑制因子(LIF)8-疊氮-環(huán)二磷酸腺苷-核糖腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6結(jié)合蛋白抗體
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)8-氨腺嘌呤核苷B淋巴因1抗體
豚鼠Rap鳥(niǎo)嘌呤交換因子1(RAPGEF1)α-腺苷T活化連接蛋白抗體
豚鼠內(nèi)肽2(EM2) 腺苷 3’-單磷酸鈉鹽轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體
豚鼠腦素受體(CNR1)腺苷 3',5'-二磷酸鈉鹽凝血酶(凝血因子II)輕鏈抗體
豚鼠補(bǔ)體因子4 (C4)腺苷 2',5'-二磷酸鈉鹽凝血酶(凝血因子II)激活肽1抗體
豚鼠神經(jīng)粘附分子(NCAM/CD56)腺苷5'-O-硫一磷酸二鋰鹽凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗體
豚鼠多巴受體D2(D2R/DRD2) Rp-腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代磷酸酯鈉鹽Tafazzin蛋白抗體
豚鼠cGMP依賴(lài)性蛋白激酶I (PRKG1)Sp--腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代磷酸酯 三銨鹽水合物TEC酪氨酸激酶蛋白抗體
豚鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)2-硫代二磷酸腺苷鈣轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
豚鼠蛋白激酶C(PKC)腺苷-2',3'-環(huán)磷酸 三銨鹽金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體
豚鼠凝血酶/抗凝血酶復(fù)合物(TAT)腺苷 5‘-三磷酸P3-[1-(2-)酯] 二鈉鹽腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體
豚鼠多形核白彈性蛋白酶(PMN Elastase)腺苷 3'-磷酸 5'-磷酰硫酸鋰鹽水合物腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體
諾如病毒GⅠ型檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）p-Nrf2/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核因子2相關(guān)因子2抗體IgG二二丁 CP
Nrn1/Cpg15/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體IgG二丁 光譜純
CD303/BDCA-2/CLEC4C 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體IgG二丁 for HPLC-GC, ≥99.5% (GC)
CD304/BDCA-4/NRP-1 /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體IgG二丁 GR,99.5%
NRP-2/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)纖毛蛋白-2抗體IgG二丁 AR，99.0%
NEDD4L/NEDD4-2/FITC 熒光素標(biāo)記泛素連接酶NEDD4-2抗體IgG氨吡 99%
Phospho-NEDD4L (Ser342) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體IgG2-氨-4-氯-6-嘧啶 98%
NRSF/REST/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)元抑制蛋白抗體IgG3-溴-2- 98%
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
