一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒
商品屬性：
產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
miRNA檢測(cè)系列 | 25T | BJ-PJ6641 |
miRNA檢測(cè)系列 | 100TX20μl | BJ-PJ6641 |
商品介紹：
描述：由于 miRNAs 分子序列較小，僅 20nt 左右，沒(méi)有 真核生物有的 Poly(A)尾巴結(jié)構(gòu)，采用傳統(tǒng) Oligo dT 引 物和隨機(jī)引物很難獲得從 miRNA 到 cDNA 的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn) 物。 公司開發(fā)出一套全新的加 A 法 miRNA 反轉(zhuǎn) 錄試劑盒，基于 Peter 改良的 miR-Q 技術(shù)， 可以對(duì)成熟的 miRNA 同時(shí)完成加 A 反應(yīng)和反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)， 直接獲得含有特異性 tag 和 15(T)的 cDNA 產(chǎn)物（如圖 1 所示）。該方法使得 miRNA 反轉(zhuǎn)錄與 mRNA 的反轉(zhuǎn)錄一 樣輕松。直接將提取的 miRNA 與反應(yīng)緩沖液混合物混合， 并置于 PCR 儀上 1 小時(shí)即可獲得高濃度的、包含所有 miRNAs 分子的 cDNA 產(chǎn)物。獲得的 cDNA 產(chǎn)物適用于 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進(jìn)行定量檢測(cè)，該方法 已被大量文獻(xiàn)所采用。
儲(chǔ)存：請(qǐng)置于-20°C，可保存 2 年；避免反復(fù)凍融
操作方法
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液
miRNA（0.01-0.1 μg）or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特別說(shuō)明： 10×miRNA RT Primer 引物為
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’，定量擴(kuò)增
用特異性上下游引物進(jìn)行擴(kuò)增，圖 2 是以 hsa-miR-21 為
實(shí)例說(shuō)明特異性上下游引物的設(shè)計(jì)方法
2. 在 PCR 儀上按以下條件進(jìn)行反應(yīng):
37°C 60min
95°C 5min
3. 獲得 cDNA 產(chǎn)物后使用 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進(jìn)行 miRNA 定量檢測(cè)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
腺病毒通用PCR試劑盒 | 乙型肝炎病毒D型PCR試劑盒 |
麥冬染料法PCR鑒定試劑盒 | 基孔肯尼雅病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
封閉蛋白1ELISA試劑盒 | 短螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
半蛋白mei抑制劑AELISA試劑盒 | 病毒性神經(jīng)壞死病病毒RT-PCR試劑盒 |
馬鈴薯Cryc基因PCR檢測(cè)試劑盒 | 鷓鴣源性成分PCR試劑盒 |
豬類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 | 豬腸道甲型科研PCR檢測(cè)試劑盒 |
抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌PCR試劑盒 | 桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
人免疫缺陷病毒1型N群RT-PCR試劑盒 | 丙型流感病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人細(xì)胞色suP450基因PCR檢測(cè)試劑盒 | 豬傳染性腹瀉病毒 |
空腸彎曲菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 馬梭菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 血漿纖維連接蛋白ELISA試劑盒 |
人溶菌mei（hLYZ）轉(zhuǎn)基因成分核suan檢測(cè)試劑盒 | B-黑色su瘤抗原ELISA試劑盒 |
難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 丙氨suan氨肽meiELISA試劑盒 |
核基質(zhì)蛋白22ELISA試劑盒 | 一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒B-細(xì)胞淋巴瘤因子9ELISA試劑盒 |
白細(xì)胞調(diào)節(jié)suELISA試劑盒 | Collybistin蛋白ELISA試劑盒 |
