產(chǎn)品名稱 | hFOB 1.19 | 貨號(hào) | AXB9825 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | hFOB 1.19：hFOB119 |
分類 | 其它系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
別稱 | hFOB1.19 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 胎兒 |
組織來源 | 骨；成骨細(xì)胞；以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | hFOB 1.19細(xì)胞是在0.6mg/mLG418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力；hFOB 1.19細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化、造骨細(xì)胞生理和激素、生長因子和對造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。 |
生物安全等級(jí) | 2 [Cells contain SV40 viral sequences] |
生長培養(yǎng)基 | DMEM/F12＋0.3mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 34℃ |
抗原表達(dá)情況 | SV40 T antigen |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CD81小鼠單克隆抗體 英文名；CD81脫氧雙加氧酶抗體 英文名；HLRC1
CD81重組兔單克隆抗體 英文名；TAPA1/CD81脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體 英文名；DTYMK
CD83抗體 英文名；CD83脫支酶同源蛋白DBR1抗體 英文名；DBR1
CD84抗體 英文名；CD84脫中胚蛋白抗體 英文名；TBR2
CD85e抗體 英文名；LILRA3/CD85e拓?fù)洚悩?gòu)酶相關(guān)功能蛋白4-2抗體 英文名；TENT4B
CD85f抗體 英文名；LILRA5/CD85f拓普西異構(gòu)酶Ⅰ單克隆抗體 英文名；Topoisomerase I
CD85g抗體 英文名；LILRA4/CD85g拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 英文名；Topoisomerase I
CD85h抗體 英文名；LILRA2/CD85h唾液過氧化物酶LPO抗體 英文名；Lactoperoxidase
CD86抗體 英文名；CD86唾液酸酶3抗體 英文名；Sialidase 3
CD8β鏈（CD8-β）抗體 英文名；CD8B唾液酸醛縮酶NPL抗體 英文名；NPL/N-acetylneuraminate lyase
CD8抗體 英文名；CD8唾液酸糖蛋白受體1抗體 英文名；ASGPR1
CD8重組兔單克隆抗體 英文名；CD8唾液酸乙酰酯酶抗體 英文名；SIAE
CD90抗體 英文名；CD90/Thy-1唾液酸轉(zhuǎn)移酶1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶抗體 英文名；CD75
CD90重組兔單克隆抗體 英文名；CD90/Thy-1唾液酸轉(zhuǎn)移酶4A抗體 英文名；SIAT4A
CD93抗體 英文名；CD93唾液酸轉(zhuǎn)移酶8D抗體 英文名；SIA8D
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
