細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞操作 | T25m2 | CS-963804 |
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞【Mouse Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話(huà)或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶(hù)接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
FLAG(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 前杯莧甾酮 HPLC≥96% 5mg
FLUORIDE血液抗凝液100毫升 茜素 HPLC≥98% 20mg
Formolsublimate固著液50毫升 羌活醇 HPLC≥98% 20mg
FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒100 強(qiáng)力霉素 HPLC≥98% 20mg
FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒100 羥基紅花黃色素A HPLC≥98% 20mg
FSH-BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25 羥基積雪草苷 HPLC≥98% 20mg
FSH-BETA蛋白共沉淀分析試劑盒5 羥基積雪草酸 HPLC≥98% 20mg
G418溶液10毫克/毫升 羥基酪醇 HPLC≥98% 20mg
Gamborg’sB5基礎(chǔ)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 羥基酪醇醋酸酯 HPLC≥98% 20mg
Gamborg’sB5*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 羥基檸檬酸 HPLC≥98% 20mg
英文名稱(chēng)HumanBonemorphogeneticproteieceptor1AELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)受體1A(BMPR1A)規(guī)格：96T/48T 胸腺肽alpha 1 Thymosin alpha 1 Acetate 質(zhì)量規(guī)格：BR,進(jìn)分
動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線(xiàn)粒體分離試劑盒10/50 替加氟 Tegafur 質(zhì)量規(guī)格：>98%
RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA試劑盒大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 替加氟（標(biāo)準(zhǔn)品） Tegafur 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定
小鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ，英文名： MBP ELISA Kit 阿昔莫司，阿西莫司 Acipimox 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseNeuroophin3,-3ELISAkit 96T/48T 阿昔莫司，阿西莫司（標(biāo)準(zhǔn)品） Acipimox 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人谷氨酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 human GAD-Ab-IgM ELISA Kit 阿達(dá)帕林 Adapalene 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKit大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 阿達(dá)帕林(標(biāo)準(zhǔn)品) Adapalene 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
AP標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 阿德福韋 Adefovir 質(zhì)量規(guī)格：>98%
MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 阿德福韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Adefovir 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ，英文名： MBP ELISA Kit 阿爾法骨化醇 alfacalcidol 質(zhì)量規(guī)格：>99%
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞操作冰凍切片組織INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 齊墩果酸(高98%） Oleanolic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR
冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 齊墩果酸(標(biāo)準(zhǔn)品） Oleanolic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
冰凍切片組織JNK/SAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 齊墩果酸 HPLC≥98% 20mg
冰凍切片組織MAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 齊墩果酸 Oleanolic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，BR
冰凍切片組織MYC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 漆黃素； 紫鉚素 HPLC≥98% 20mg
冰凍切片組織NFKAPPABP50蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 漆黃素（標(biāo)準(zhǔn)品） Fisetin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
冰凍切片組織NFKAPPABP65蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 漆黃素 HPLC≥98% 20mg
冰凍切片組織P16蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 漆黃素 Fisetin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,BR
冰凍切片組織P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 榿木酮 HPLC≥98% 20mg
冰凍切片組織P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 七葉皂苷鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Aescinate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
