參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：柯薩奇病毒B2型熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
貨號：CP99275
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
110657-98-2 Lipoxin A5 100μg Erysipelothrix spp丹毒絲菌屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110657-98-2 Lipoxin A5 25μg Erysipelothrix rhusiopathiae紅斑丹毒絲菌（豬丹毒桿菌）LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110657-98-2 Lipoxin A5 50μg Erysipelothrix spp丹毒絲菌屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110683-10-8 N-(p-amylcinnamoyl) Anthranilic Acid 100mg Truperella pyogenes化膿隱秘菌LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110683-10-8 N-(p-amylcinnamoyl) Anthranilic Acid 250mg Truperella pyogenes化膿隱秘菌LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
辛可尼丁（標準品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用Cinchonidine ELISAKitUP人尿蛋白規(guī)格：48T/96T 氧化酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
水楊酸-4-辛基苯酯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4-Octylphenyl Salicylate 小鼠Smad同源物2(Smad2)ELISA試劑盒 ，英文名： Smad2 ELISA Kit Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISA試劑盒大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
氧化偶氮苯-4,4'-二羧(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 96T/48T HumanHepatitisGvirusIgG,HGV-IgGELISA試劑盒人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(N)4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 大鼠環(huán)1酸腺苷(cAMP)試劑盒 Rat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit HumanLeinizingHormone-ReleasingHormone，LHRHELISAKit人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
柯薩奇病毒B2型熒光PCR法檢測試劑盒CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-纈氨醇 Fmoc-Valinol質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
皮膚癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1mlL-賴氨酸鹽酸鹽H-Lys-OH.HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
GT1.1細胞，小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素) 人卵巢癌細胞系,Anglne細胞 人骨骼肌細胞裂解物HSkMCLL-鳥氨酸鹽酸鹽L-Ornithine mono質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
恒河猴腎細胞;LLC-MK2L-天門冬氨酸L-Aspartic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
IFNW1 Others Human 人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-天門冬氨酸(標準品)L-Aspartic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%(T),標準品
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
