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    T25m2 小鼠胰腺上皮細胞提取物說明

    參考價
    面議
    具體成交價以合同協議為準
    • 型號T25m2
    • 品牌
    • 所在地上海市
    • 更新時間2021-06-21
    • 廠商性質經銷商
    • 入駐年限9
    • 實名認證已認證
    • 產品數量9300
    • 人氣值293199
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    上海莼試生物技術有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology  Co. Ltd.  專業服務于生命科學領域,擁有分子生物學、醫學、藥學、化學等方面的科研技術團隊,經營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術先進、質量穩定的科研產品。為全國乃至于世界各地科研機構、工業、電子、醫療、科技等領域的客戶,提供系統的產品資源及配套技術服務。推出十幾個種類產品線,部分產品接受定制服務!



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    小鼠胰腺上皮細胞提取物說明如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
    小鼠胰腺上皮細胞提取物說明 產品詳情

     

    我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1 HBV HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

    產品名稱

    規格

    貨號

    小鼠胰腺上皮細胞提取物說明

    T25m2

    CS-964087

    小鼠胰腺上皮細胞提取物【Mouse Pancreas: Normal Pancreas Derivatives】小鼠胰腺上皮細胞提取物是從小鼠原代胰腺上皮細胞提取的,小鼠原代胰腺上皮細胞從正常小鼠胰腺組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

    RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

    cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mgRNA68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。

    蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。

    潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
    細胞處理:
    1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
    2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
    對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
    1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
    2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
    3.6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
    4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
    細胞處理方法:
    以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
    一.貼壁細胞
    客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
    肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
    顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
    嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
    將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
    PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
    1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37,5%CO2  培養。
    二.懸浮細胞
    1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
    2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
    3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
    4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
    5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37,5%CO2  培養115092-85-8  Carmoxirole hydrochloride  5mg  Penicillium spp.青霉通用LAMP試劑盒 

    115103-54-3  Tiagabine  100mg  Hanzalova Virus漢扎洛瓦病毒RT-LAMP試劑盒 

    115103-54-3  Tiagabine  10mg  Dermatobia hominis膚蠅LAMP試劑盒 

    115103-54-3  Tiagabine  10mg  Hantaan virusHTNV)漢灘型漢坦病毒RT-LAMP試劑盒 

    115103-54-3  Tiagabine  10mM(in1mLDMSO)  Dermatobia hominis膚蠅LAMP試劑盒
    IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) 倍他環糊精,2,6--β-環糊精Me-β-CD質量規格:>98%,BR

    IMR-32 神經母細胞瘤細胞埃博霉素B;帕土匹龍Epothilone B(EPO906, Patupilone) 質量規格:>98%,BR

    CEM/C1急性細胞白血病細胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301質量規格:>98%,BR

    VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 進分瓊脂粉Agar質量規格:BR,進分

    小鼠垂體細胞(MPC)(5×105) 5637, 膀胱癌細胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine質量規格:>98%,油狀
    小鼠胰腺上皮細胞提取物說明SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 細胞裂解液 (陽性對照) 布地奈德-d8Budesonide-d8質量規格:美國進口

    EJ 膀胱癌細胞6α-羥基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide質量規格:美國進口

    SW1116結腸腺癌細胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide質量規格:美國進口

    CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)亞葉酸鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質量規格:美國進口

    脂肪細胞-內臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來源), 癌細胞 Human喜樹堿鈉鹽 Camptothecin質量規格:美國進口
    細胞培養操作規程:
    一.培養基及培養凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優質胎牛血清,10%
    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養箱濕度為70%-80%
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

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