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    15次 柱式動物線粒體DNA提取試劑盒

    參考價
    面議
    具體成交價以合同協議為準
    • 型號15次
    • 品牌
    • 所在地上海市
    • 更新時間2021-07-30
    • 廠商性質經銷商
    • 入駐年限9
    • 實名認證已認證
    • 產品數量9300
    • 人氣值291845
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    柱式動物線粒體DNA提取試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區域操作。
    柱式動物線粒體DNA提取試劑盒 產品詳情

    注意事項:
    加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
    按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
    底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
    洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
    使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器
    實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
    試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
    不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

    參數規格:
    產品名稱:柱式動物線粒體DNA提取試劑盒
    產品分類:RNA/DNA提取試劑盒
    貨號:CP100361
    產品規格:15
    產品運輸:低溫運輸
    產品保存:-20保存
    產品有效期:一年
    產品特點:
    高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
    高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
    操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
    高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
    10×PCR buffer                   
    5 μl     dNTP mix 
    2mM             
    4 μl     
    引物110pM                 
    2 μl     
    引物210pM                 
    2 μl     Taq
     2U/μl               
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl  
    1 μl      
    ddH2O 50 μl  
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2
    :調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 保溫7min

    使用方法:
    一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
    1.
    標記 6 個離心管,分別為 765432
    2.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
    3.
    7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
    4.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
    6.
    重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
    二、樣品 DNA 的制備
    7.
    用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
    8.
    如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
    三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
    9.
    如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

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    儲存條件:
    14
    或-20樣品收集、處理及保存方法
    1.
    血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
    2.
    血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
    3.
    細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
    4.
    組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
    5.
    保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


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