實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數。
公司采用的全是進口原材料研，發靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠。
產品名稱 | 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat cytosolic phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74431 |
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樣品收集、處理及保存：
1）.細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
脂聯素受體2(ADIPOR2)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 堿線菌屬 5g
親環素A(CYPA)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 薄層菌 100g
朊病毒蛋白(PRNP)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 紅色紅曲霉 25g
血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 葡萄座腔菌 5g
信號素3A(SEMA3A)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 賴氨酸芽胞桿菌屬 5g
Polycomb組環指蛋白4(PCGF4)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 禾赤鐮孢 1g
三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% Debaryomyces prosopidis 1g
碳酸酐酶ⅤB(CA5B)(酶聯免疫吸附試驗法) 97%,含0.1% TBC穩定劑 土曲霉 25g
谷光甘肽合成酶(GSS)(酶聯免疫吸附試驗法) 97%,含0.1% TBC穩定劑 枯草芽孢桿菌 5g
肝配蛋白A3(EFNA3)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 樹舌 1g
中期因子(MK)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 飼料類芽孢桿菌 25g
Slit同源物3(Slit3)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 慢生根瘤菌 5g
精氨酰tRNA合成酶(RARS)(酶聯免疫吸附試驗法) ≥96% 香菇 25g
電碳酸氫鈉協同轉運蛋白4(NBC4)(酶聯免疫吸附試驗法) ≥96% ATCC 700324 5g
Ras相關C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 美澳型核果褐腐病菌 5ml
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 截形炭團菌 25g
非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶11(PTPN11)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 球孢白僵菌 5g
賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)(酶聯免疫吸附試驗法) 95% 嗜熱鏈球菌 1g
大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa試劑盒石蠟切片總游離膽固醇菲律賓（FILIPIN）熒光間接染色 MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) 100 ul
石蠟切片總游離膽固醇菲律賓（FILIPIN）熒光直接染色 NEO1(Neogenin) 20 ul
冰凍切片總游離膽固醇菲律賓（FILIPIN）熒光染色 NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) 100 ul
細胞總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光染色 PACRG(Parkin coregulated gene protein) 100 ul
石蠟切片總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光間接染色 CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) 100 ul
石蠟切片總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光直接染色 JUP(Junction plakoglobin) 20 ul
冰凍切片總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光染色 CFL1(Cofilin-1) 100 ul
細胞甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）染色 EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) 100 ul
石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）間接染色 IZUMO1(Izumo sperm-egg fusion protein 1) 100 ul
石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）直接染色 NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) 20 ul
冰凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）染色 NEO1(Neogenin) 100 ul
細胞脂肪酸費斯克勒（Fischler）染色 MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) 20 ul
冰凍切片脂肪酸費斯克勒（Fischler）染色 PACRG(Parkin coregulated gene protein) 100 ul
石蠟切片脂肪酸費斯克勒（Fischler）間接染色 CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) 100 ul
石蠟切片脂肪酸費斯克勒（Fischler）直接染色 SNX1(Sorting nexin-1) 100 ul
細胞磷脂皮爾斯（Pearse）染色 NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) 500 ul
操作步驟：
1）運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發生加樣上的差錯。
2）依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定，能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3）參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應當即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
