選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。
產品名稱：大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa試劑盒
英文名稱：Rat E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA Kit
規格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養上清、細胞裂解液
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具有如下優點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節省實驗經費。
試劑配制：
1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結果要在15-30 min內完成，定性測定用肉眼判讀試驗結果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。
瘦素(LEP)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 微紫青霉 1g
瘦素(LEP)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 25g
L選擇素(SELL)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 玉蕈、真姬菇 5g
單核細胞趨化蛋白2(MCP2)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 里氏木霉 1g
單核細胞趨化蛋白2(MCP2)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 黃傘(10號) 1g
單核細胞趨化蛋白2(MCP2)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 短波單胞菌屬 250mg
單核細胞趨化蛋白2(MCP2)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌 25g
巨噬細胞來源趨化因子(MDC)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 5g
抗平滑肌抗體(ASMA)(酶聯免疫吸附試驗法) >95.0%(GC) 紫帶擬迷孔菌 100g
組織蛋白酶K(CTSK)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 黑曲霉 1g
組織蛋白酶K(CTSK)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 球孢白僵菌 1g
組織蛋白酶K(CTSK)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 青枯假單胞菌 5g
組織蛋白酶K(CTSK)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 解脂亞羅酵母 25g
組織蛋白酶K(CTSK)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 釀酒酵母 5g
組織蛋白酶K(CTSK)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 地中海中間根瘤菌 25g
胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 霍氏腸桿菌 5g
胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)(酶聯免疫吸附試驗法) 1M THF溶液 嗜鹽動性球菌 25ml
胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 大腸埃希氏桿菌 1g
大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa試劑盒COLLAGEN I蛋白表達定量 CVB-IgM(Coxsackievirus B-Immunoglobulin M) 300 ul
細胞COLLAGEN II蛋白表達流式細胞儀 CVB-IgG(Coxsackievirus B-Immunoglobulin G) 100 ul
載玻片細胞COLLAGEN II蛋白表達熒光顯微鏡 ECHO-IgG(Enteric CytopathicOrphan virus-Immunoglobulin G) 20 ul
冰凍切片組織COLLAGEN II蛋白表達熒光顯微鏡 ECHO-IgM(Enteric CytopathicOrphan virus-Immunoglobulin M) 100 ul
石蠟切片組織COLLAGEN II蛋白表達熒光顯微鏡 HDV-IgM(Hepatitis D Virus-Immunoglobulin M) 100 ul
載玻片細胞βCOLLAGEN II蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡 TOX-IgM(Toxoplasma-Immunoglobulin M) 20 ul
冰凍切片組織COLLAGEN II蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡 TOX-IgG(Toxoplasma-Immunoglobulin G) 100µl
石蠟切片組織COLLAGEN II蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡 EV71-IgG(Enterovirus 71-Immunoglobulin G) 100 ul
細胞COLLAGEN II蛋白表達比色法定量 AS-IgG(anti sperm-Immunoglobulin G) 100 ul
細胞COLLAGEN II蛋白表達熒光定量 EM-IgG(Endometrium-Immunoglobulin G) 100 ul
COLLAGEN II蛋白表達西方雜交分析 A16-IgM(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin M) 100 ul
COLLAGEN II蛋白免疫共沉淀分析 EV71-IgM(Enterovirus 71-Immunoglobulin M) 100 ul
COLLAGEN II蛋白表達定量 HCG-IgG(chorionic gonadotropin-Immunoglobulin G) 100 ul
脘蛋白基因變異分析 HP-IgG(Helicobcter Pylori-Immunoglobulin G) 20 ul
活體細胞脘蛋白去糖基化 EM-IgG(Endometrium-Immunoglobulin G) 100 ul
體外脘蛋白去糖基化 HCG-IgG(chorionic gonadotropin-Immunoglobulin G) 100 ul
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
