48T/96T 大鼠雌酮（E1）elisa試劑盒

公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無(wú)效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
大鼠雌酮(E1)elisa試劑盒操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
血管舒張劑激活磷蛋白(VASP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　厚垣鐮孢菌　5g

神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯酶(NTE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　灰紅鏈霉菌　100mg

整合素αV(ITGαV)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　皮氏羅爾斯通氏菌　1g

基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白5(MXRA5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　短小芽孢桿菌　250mg

斯鈣素1(STC1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　固氮菌　1g

Klotho蛋白(KL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　蠟狀芽孢桿菌　5g

層黏連蛋白受體1(LAMR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　環(huán)棱褐孔菌　100g

心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　殼菌　25g

細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　谷氨酸棒桿菌　5g

生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　活潑微球菌　1g

生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　翹鱗香菇　25g

多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　鏈格孢　5g

異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　白腐菌　1g

骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原2(BST2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　粘絲膜菌　100g

膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　霍氏格里蒙特氏菌　25g

Ⅳ型膠原α3(COL4α3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　美澳型核果褐腐病菌　500g

原鈣黏素15(PCDH15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　好食脈孢菌　100g

銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　動(dòng)物雙歧桿菌　25g
甲酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理　IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) 　100 ul

檸檬酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理　IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) 　20 ul

物理法石蠟切片松動(dòng)組織抗原修復(fù)處理　DSG3(Desmoglein-3) 　100 ul

胰蛋白酶抗原修復(fù)溶液　(NADPH oxidase 1) 　100 ul

抗體熒光標(biāo)記制備（見蛋白/抗體標(biāo)記專題）　LAD1(Ladinin-1) 　100 ul

HRP標(biāo)記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液　ITGA5(Integrin alpha-5) 　100 ul

AP標(biāo)記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液　XBP1(X-box-binding protein 1) 　20 ul

通用抗體稀釋溶液　DKK2(Dickkopf-related protein 2) 　100 ul

HRP生物素穩(wěn)定/稀釋溶液　C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) 　20 ul

AP生物素穩(wěn)定/稀釋溶液　CHIA(Acidic mammalian chitinase) 　100 ul

熒光生物素穩(wěn)定/稀釋溶液　PDX1(Pancreas/duodenum homeobox protein 1) 　100 ul

通用型HRP復(fù)合物穩(wěn)定/稀釋溶液　UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) 　20 ul

酪胺信號(hào)擴(kuò)增　ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) 　100 ul

生物素標(biāo)記二抗DAB顯色　IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) 　100 ul

FITC標(biāo)記二抗POD轉(zhuǎn)換　DSG3(Desmoglein-3) 　100 ul

超敏型HRP－TMB底物顯色　PRKCE(Protein kinase C epsilon type) 　100 ul