ELISA試劑盒的重復使用可能會影響實驗結果的準確性。一般不建議重復使用已經使用過的試劑盒組分,特別是酶標板和試劑。具體分析:
1、酶標板的重復使用:酶標板通常不建議重復使用,因為即使經過洗滌,部分抗體或抗原可能未去除,導致結合位點封閉,引起假陰性結果。如果酶標反應已經加入了終止液,更不建議重復使用,因為終止液會破壞包被的抗體或抗原的活性。
2、抗體或酶偶聯物的重復使用:偶聯抗體(如streptavidin-HRP)的濃度過高或重復使用,可能導致非特異性結合增加,影響實驗的特異性和準確性。
3、試劑盒組分的混用:不同批次或不同品牌的試劑盒組分混用會導致實驗結果的不準確,因為每個試劑盒的組分都是經過優化匹配的。
4、標準品和稀釋液的重復使用:標準品和稀釋液的污染或重復使用可能會引入干擾物質,影響標準曲線的線性和實驗結果的可靠性。
★如果確實需要重復使用,必須確保以下幾點:
l 洗滌:在未加入終止液前,可以嘗試通過多次洗滌來去除未結合的抗原或抗體,以避免殘留。
l 避免終止液:一旦加入終止液,酶反應會被終止,包被的抗體或抗原將失去活性,因此不建議再次使用。
l 重新包被:理論上,可以使用干凈的聚苯乙烯微量滴定板進行重新包被,但這對于常規檢測來說并不實際,且成本效益不高。
因此,為了確保實驗結果的準確性,應嚴格遵循ELISA試劑盒的說明書,不建議重復使用已經使用過的試劑盒組分,特別是酶標板和試劑,最好使用一次性酶標板。如果實驗材料有限,可以考慮其他替代方案,如使用標準曲線進行樣品濃度的校正,或者采用其他檢測方法。
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