戴安液相色譜儀操作及原理

來源：賽默飛色譜及痕量元素分析 2024年11月29日 00:56

戴安液相色譜儀是一種高效、精確的分離和分析化合物的設備，廣泛應用于生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析等領域。以下是戴安液相色譜儀的操作步驟及原理的詳細介紹：

一、操作步驟

1. 操作前準備

流動相配制：根據所供試品的性質、文獻資料或工作經驗，按比例配制流動相。并根據流動相的性質選擇合適的濾膜（如0.45um的有機膜或水相膜）對流動相進行過濾，然后進行超聲脫氣10\~15分鐘。

樣品處理：稱取或量取適量的對照品或供試品，用適當的溶劑（最好是流動相或流動相的主成分）進行充分溶解，使其濃度達到0.1\~1mg/mL（可根據檢測結果再調節濃度）。并使用合適的濾膜（如0.45um的有機針頭濾膜或水相針頭濾膜）對樣品溶液進行過濾。

色譜柱選擇：根據樣品的性質選擇適當的色譜柱。

2. 開機與儀器設置

打開電源，啟動電腦和液相色譜儀工作站軟件。

旋開泵上的排液閥，設置流動相的比例及流速，沖洗流路中的氣泡。

設置柱溫箱溫度，清洗進樣器。

3. 樣品分析

建立儀器方法和處理方法（或調用已有的方法）。

打開檢測器（如氘燈），設置波長、采集頻率和時間常數，監視基線直至穩定。

樣品通過自動進樣器注入色譜系統，進行分離和檢測。

樣品分析結束后，關閉檢測器，沖洗色譜柱，并依次關閉泵馬達、工作站、檢測器、柱溫箱、自動進樣器等設備的電源。

二、工作原理

戴安液相色譜儀的工作原理基于色譜技術，具體來說：

流動相：攜帶樣品通過色譜柱的介質。在泵的作用下，流動相以穩定的流速連續送入色譜柱系統。

樣品進樣：樣品溶液通過進樣器注入色譜柱系統。進樣器一般采用定量環或微量注射器，確保進樣量的準確性。

色譜柱分離：色譜柱是液相色譜儀的核心部件，由固定相和載體組成。樣品在流動相的作用下通過色譜柱，不同組分在色譜柱中的吸附和洗脫能力不同，從而實現分離。

檢測器檢測：分離后的各組分依次進入檢測器，檢測器根據各組分的性質將其轉化為電信號進行記錄。常見的檢測器有紫外可見光檢測器、熒光檢測器等。

數據處理：液相色譜儀配備的數據采集和處理系統可以實時記錄各組分的峰形和峰高，并進行積分和歸一化處理。通過對比標準品和樣品的數據，可以對組分進行定性分析和定量計算。

三、注意事項

在操作過程中，要時刻注意防止溶劑瓶內的流動相被用完，避免空泵運轉損壞儀器。

流動相應先脫氣以避免產生氣泡影響流量穩定性。

溶劑泵的工作壓力不能超過規定的最高壓力。

長期不用時應用甲醇沖洗各個通道并保持泵的清潔。

色譜柱的保存和使用要遵循一定的規范以避免降低柱效或破壞固定相。

戴安液相色譜儀是一種功能強大且操作相對簡便的分析設備。通過了解其操作步驟和工作原理以及注意事項，可以更好地利用該設備進行樣品分析和研究。

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