【Hanson】體外釋放測試(IVRT)在半固體外用制劑中的應用

體外釋放試驗(IVRT)在產(chǎn)品開發(fā)以及納米乳劑、懸浮劑、多囊脂質(zhì)體和微球等復雜藥物產(chǎn)品的監(jiān)管評估中日益受到關注和重視，因為 IVRT 提供了有關藥物產(chǎn)品的質(zhì)量和性能的關鍵信息理想的 IRT 方法應能將藥物產(chǎn)品關鍵質(zhì)量屬性(CaAs)的變化與藥物的釋放特性直接聯(lián)系起來，從而提供寶貴的信息，確保批次與批次之間的質(zhì)量一致性，促進對批準后變化的評估，并協(xié)助進行產(chǎn)品比較，以支持生物等效性的確定。

IVRT 是文獻中列出的表征外用半固體制劑的方法之一。該測試并不一定與體內(nèi)性能或生物利用度相關聯(lián)；但它能讓人深入了解產(chǎn)品性能以及因制劑特性而導致的產(chǎn)品性能變化。

圖1. IVRT儀器-Teledyne Hanson Phoenix 干熱擴散測試系統(tǒng)和干熱擴散池

圖2. IVRT儀器的各個部分

對藥物的物理和化學特性進行了制表和評估。IVRP 在評估任何可能影響產(chǎn)品質(zhì)量和性能的批準后工藝變更方面發(fā)揮著非常重要的作用。浸泡池系統(tǒng)的自動化相對較容易。在這項研究中，我們開發(fā)了一種方法，它甚至可以檢測配方和生產(chǎn)過程中可能發(fā)生的微小變化，并驗證了該方法的準確性、可重復性和選擇性。在方法開發(fā)過程中，考慮并優(yōu)化了以下步驟，以供進一步研究。

IVRT 方法是為檢測不同批次之間的差異而開發(fā)的，但如果產(chǎn)品發(fā)生任何可能影響性能的變化，IVRT 方法都能充分顯示出來。

a.受體介質(zhì)的選擇

b.膜的選擇

c.選擇取樣時間點和重復介質(zhì)實驗

d.測試與參考

A. 受體介質(zhì)的選擇

如同行文獻所述，"可使用適當?shù)氖荏w介質(zhì)，如水溶性藥物的水緩沖液或稀釋水溶性藥物的水醇介質(zhì)”。因此，在確定基本檢測方法后，方法開發(fā)的首要任務是測量原料藥在幾種溶劑中的溶解度，從磷酸鹽緩沖溶液(PBS)等水溶液到異丙醇/PBS-50/50(v/v)等水醇溶液。目的是找出能在 IVRT 接收容器中提供沉降條件的溶劑。當受體介質(zhì)具有相對"較高的溶解或帶走藥物的能力"，且受體介質(zhì)"在試驗結(jié)束時超過 cs(藥物在釋放基質(zhì)中的溶解度)的 10%"時，就會出現(xiàn)沉降條件。通常會選擇三種介質(zhì)(包括水基和水醇基溶劑)進行進一步的NRT評估。至少必須保持沉降條件，受體溶液必須能夠容納超過最后一個取樣點釋放的物質(zhì)量。理想情況下，受體溶液應能溶解 10 倍于測試期間釋放量的物質(zhì)。例如，如果測試結(jié)束時釋放了 2 毫克產(chǎn)品，那么樣品池中的受體介質(zhì)至少應能容納 2.1 毫克。受體介質(zhì)最好能溶解 20 毫克。可使用的典型溶劑有乙腈、乙醇、甲醇和異丙醇與水混合。典型比例不應超過 80/20。應根據(jù)原料藥的溶解度和化學性質(zhì)選擇溶劑。

使用不同介質(zhì)進行溶解度分析：

表1. 溶解度研究結(jié)果

可接受的沉降條件是指實驗期間受體介質(zhì)中活性物質(zhì)的最大濃度不超過其在受體介質(zhì)中最大溶解度的 30%。沉降條件通常發(fā)生在介質(zhì)體積至少是飽和體積 3-10 倍的情況下。為實現(xiàn)線性釋放并檢查至少 70%的活性物質(zhì)釋放情況，我們使用不同的介質(zhì)進行了進一步的實驗。在受體介質(zhì) pH 值為 7.4 的磷酸鹽緩沖鹽水中觀察到了最大溶解度:乙醇(60:40)。在整個實驗過程中，均按照歐盟標準達到了沉降條件。

B. 膜的選擇

膜應確保產(chǎn)品和受體介質(zhì)保持分離，以便確保測試配方在整個測試期間保持不變。膜不應限制活性物質(zhì)的釋放速度。膜應與藥物產(chǎn)品配方兼容，不會與活性物質(zhì)結(jié)合。膜有多種選擇，包括最近切除的組織、組織結(jié)構(gòu)、尸體組織和合成膜。影響選擇適當膜的因素包括與測試材料的兼容性、可用性、可重復性、成本，以及重要的實驗目標本身。合成膜在孔徑、厚度和親水性方面的變化是可控的。由于許多半固體產(chǎn)品的主要成分是水，因此通常使用親水性/親水性合成膜。在膜篩選過程中，通常會評估三種具有相同孔徑的聚合膜。常用的膜有 Tuffryn Supor®(聚砜)、纖維素、Acetate Plus®(醋酸纖維素)、尼龍、聚四氟乙烯和聚碳酸酯。使用兩張含 100% 樣品的濾膜進行濾膜選擇。0.45 微米的聚碳酸酯 Nuclepore 膜過濾器和 0.45 微米的尼龍膜過濾器被用于開發(fā)研究，兩種膜獲得的結(jié)果幾乎相似。根據(jù)膜的可用性，進一步研究使用了0.45µ 尼龍膜過濾器。

C. 選擇取樣時間和重復介質(zhì)實驗

為確保藥物的最大釋放量，在 30 分鐘到 6 小時的不同時間間隔內(nèi)采集樣品，采集條件如下。

發(fā)現(xiàn) RSD% 和回歸均在接受標準范圍內(nèi)。所有樣本單元的斜率都在接受標準范圍內(nèi)。6 小時后的釋放時間點達到飽和。為避免受體介質(zhì)蒸發(fā)，所有的細胞培養(yǎng)皿都被封蓋。觀察到的結(jié)果顯示所研究的時間點也是線性的，并且釋放情況良好，結(jié)果如下。

圖3. 藥物釋放曲線

根據(jù)上述結(jié)果，所有單元的 RSD%、回歸和斜率都在接受標準之內(nèi)。

D. 測試與參考

所開發(fā)的方法用于比較試驗產(chǎn)品和參照產(chǎn)品在以下條件下的釋放曲線，以顯示制劑等效性。

該產(chǎn)品是為歐洲市場開發(fā)的。因此，采用了 EMA 準則來驗證結(jié)果。根據(jù) EMA 關于外用產(chǎn)品的質(zhì)量和等效性的指南草案，測試產(chǎn)品和參照產(chǎn)品平均值比值的 90% 置信區(qū)間應在 90-111% 的接受區(qū)間內(nèi)。上述結(jié)果符合接受區(qū)間，因此得出結(jié)論，試驗產(chǎn)品和參照產(chǎn)品是等效的。

方法驗證

驗證的目的是證明所使用的測試方法適合其預期目的，并建立文件證據(jù)，高度保證該方法在整個過程中產(chǎn)生一致和同步的結(jié)果，并符合預定的質(zhì)量屬性。該方法針對以下參數(shù)進行了驗證。選擇性(空白和安慰劑干擾)、特異性、線性、精密度和準確度、回收率、膜惰性、中間精密度和劑量鑒別。

IVRT 方法驗證研究摘要

IVRT 是一種評估半固體藥物釋放的有效方法。IVRT 可作為產(chǎn)品開發(fā)過程中的一種方法，也可在貨架期研究期間評估產(chǎn)品質(zhì)量，或作為批次放行的質(zhì)量控制測試。它是將測試產(chǎn)品（仿制藥）與參比產(chǎn)品（參比上市藥物）進行比較以發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品等效性的絕亻圭體外工具。Recipharm 已根據(jù)監(jiān)管要求開發(fā)并驗證了 IVRT 方法。作為一家全球性的 CDMO，Recipharm 能夠為不同地區(qū)的客戶提供產(chǎn)品開發(fā)、分析方法開發(fā)和驗證活動方面的支持。Phoenix RDS VDC 系統(tǒng)提供了令人滿意的結(jié)果，符合監(jiān)管標準。

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