新國標口腔清潔護理用品 牙膏對去除外源性色斑效果的實驗室測試方法

     本文件規定了牙膏對去除外源性色斑效果的實驗室測試方法的原理、試劑和材料、儀器設備、測定步驟、結果計算等內容。本文件適用于牙膏采用物理機械磨擦方法，對外源性色斑去除效果測定。對于具有漂白和光學增白效果的產品，測定時考慮本文件的適用性。

測試原理：

     唾液在口腔內會在牙齒表面形成恒定的一層附著力強的薄膜，部分細菌在牙齒上分解食物或日常飲食帶有深色的食物、飲料(紅茶、醬油、巧克力、咖啡等）會使該薄膜著色，逐漸積累形成較難去除的外源性色斑。本方法采用牛牙作為底物，經切割、樹脂鑲嵌、拋光制成規則磨塊，將其人工染色獲得外源性色斑，模擬刷牙后利用色差計測量牙齒白度變化差異，計算牙膏對外源性色斑的相對清潔率。

儀器與設備

               SMY-01牙磨塊刷磨儀                                SY-01牙磨塊染色儀

1刷磨儀:V8刷磨儀或L8-II刷磨儀或其他等效產品。刷磨儀機位至少8個,刷磨載荷及次數可調，刷磨載荷可控（精度0.1 g）。

2分析天平:感量為0.01 g。

3染色裝置:具有與電動機相連的轉輪，轉輪上有可以容納牙磨塊的載具，轉輪下方配有一定容量的水槽，轉輪轉速大于等于2 r/min。配備2個功率為60 W的加熱燈泡。染色裝置相關示例見附錄B.

4色差計:可以測試物體白度的L值，精度不小于0.1。

5低速精密切割機:轉速范圍（O~300) r/min，且配有精密千分尺。

6磨拋機:具有連續型號的碳化硅研磨盤（最細600目）。

測定步驟

牙模塊的制備

1牛牙篩選及保存

挑選牛牙(5.13)若干顆，要求根部無齲壞，頰側無白堊色斑塊、氟斑及肉眼可見缺陷、裂縫，牛牙的徑向長度至少14 mm，牙釉質最窄處寬度至少2mm，刮除所有軟組織殘留物，貯存于0.1%溶液或其他具有消毒作用但不改變牙齒物理性質的中性溶液內。

2牙釉質塊的制備和鑲嵌

用低速精密切割機切除牛牙根部后，將牛牙釉質部分切割成若干約5mm×5mm×2mm的牙釉質塊。將牙釉質塊放入模具中，釉質面朝外，倒入義齒基托樹脂使牙釉質塊被包埋，且液面與模具厚度相平，待樹脂凝固后即制成牙磨塊。

注:相關示例見附錄C。牙釉質塊的規格根據色差計孔徑規格而定，牙釉質塊大小覆蓋色差計的測量孔。

3 牙磨塊的拋光

水冷條件下，在磨拋機上使用180目砂輪將牙磨塊釉質面打磨至露出，且牙磨塊上下表面水平，再使用600目砂輪拋光30s至表面光滑。制備好的牙磨塊保存于水中備用。

注:若牙釉質中出現淡黃色區域表明磨蝕過度，需舍棄該牙磨塊。

4牙磨塊的酸蝕

將拋光后的牙磨塊置于燒杯中，加入1%鹽酸溶液確保液面浸沒牙磨塊，用玻璃棒攪拌60s，用水沖洗3次，然后依次用飽和碳酸鈉溶液和1%植酸溶液按上述步驟進行處理。

注:經過酸蝕的牙磨塊在當天開始染色。

2染色

將酸蝕后的牙磨塊放入染色裝置的樣品槽中,將染色裝置的轉速調為2r/min，打開加熱燈泡，加入染色液至染色裝置的染液池中，確保液面浸沒一排的樣品槽。染色2天后，將牙磨塊從樣品槽中取出，用水將牙磨塊表面污物沖洗干凈，用紙擦干表面水分。目測挑選牙釉質染色均勻的牙磨塊，于10分鐘內用色差計測量牙釉質的白度值L。若牙釉質白度值L達不到40~50范圍則繼續進行染色;若牙釉質白度值L小于40則舍棄。染色完成后，將牙磨塊保存于水中備用，保存時間不宜超過2周。

注:染色過程中染色液因蒸發逐漸減少，24h后更換新配制的染色液并確保液面浸沒一排的樣品槽。

3牙磨塊的分組

選取16個染色完成后的牙磨塊用紙擦干表面水分，進行隨機分組，樣品組和對照組分別8個牙磨塊。用色差計測量牙釉質的白度值(Lw)，采用t檢驗分析樣品組和對照組的牙釉質白度值(L"前），要求組間差異無統計學意義(P>0.05）。

4 牙膏漿液制備

稱取樣品牙膏600g(精確至0.01g)于2000mL的燒杯中，加入960g的水用玻璃棒攪拌分散后，用電動攪拌器連續攪拌15min。

5刷磨處理

將標準牙刷和牙磨塊(7.3)裝刷磨儀(6.1)上，調節牙刷對牙磨塊的垂直壓力為150g+2g，然后設置刷磨儀(6.1)的往返頻率為100r/min。往樣品組和對照組的漿料杯中分別加入牙膏漿液(7.4)和對照磨擦劑漿液（5.22)，每個漿料杯中加入等體積漿液，保證漿液浸沒牙磨塊。啟動刷磨儀，往返刷牙600次。

刷磨結束后,將牙磨塊取下用水沖洗3次至無可見牙膏漿殘留,用紙擦干表面水分,用色差計于10min內測量牙釉質白度值（L后）。

注:每次試驗時都需要更換新牙刷。少量樣品可能出現沉降現象，在刷磨中途進行牙膏漿的攪拌。