超聲波細(xì)胞粉碎儀的常見問題解疑

一、問：鏈霉菌超聲破碎的，用的方法條件是什么？

答：前處理一般就是配置成一定濃度的菌懸液。使用超聲波細(xì)胞粉碎儀進(jìn)行超聲破碎時(shí)采用的具體條件是：

1、取細(xì)菌的 24 h 培養(yǎng)液于 5 000 r／min 下離心 5 min 收集菌體．

2、用 pH 7．5 的 Na2HPO -NaH2PO 緩沖液洗滌 3 次，再用該緩沖液將菌體配成 1：3 的菌懸液．置于 40 mL 大塑料試管內(nèi)．

3、將大塑料試管置于冰浴中，采用超聲波破碎（功率 200 W，1／2”探頭，破碎 30 s，間歇 30 S）．

4、破碎液于 12 000 r／min下高速冷凍離心 30 min，收集細(xì)胞碎片和上清液，超聲破菌流程與 上述基本一致，就是洗滌菌體也可以用預(yù)冷的生理鹽水或 pH8 的 Tris－HCl，洗滌一次就可以。另外超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大，功率可以到 400－600w，超 5s，停 5s，冰浴，要加終濃度 1 mM 的 PMSF。為確定合適的超聲強(qiáng)度和次數(shù)，有必要隨時(shí)鏡檢觀察菌體是否*破碎。放線菌屬于原核生物系統(tǒng)進(jìn)化樹上的（G＋C）摩爾百分含量（mol％）高的革蘭氏陽性菌分枝類群。在做大腸桿菌超聲時(shí)，采用的是 400W超聲波細(xì)胞粉碎儀，超5停5的方法，效果不錯(cuò)，但是用在鏈霉菌上，似乎沒什么效果。會(huì)不會(huì)就是由于細(xì)胞壁組成差異造成的呢，因?yàn)榇竽c桿菌式屬于革蘭氏陰性菌的。

二、超聲波細(xì)胞粉碎儀結(jié)構(gòu)上有啥特點(diǎn)？

超聲波細(xì)胞破碎儀的主要特點(diǎn)有一下幾個(gè)方面：

1、超聲波細(xì)胞粉碎儀可儲(chǔ)存5個(gè)控制模式。

2、定時(shí)數(shù)字顯示，輸出能量由光條顯示，0～連續(xù)可調(diào)，操作直觀方便。

3、超聲波細(xì)胞粉碎儀工作方式有間斷和連續(xù)兩種選擇，間斷工作時(shí)，脈沖寬度和間斷時(shí)間可分別設(shè)定。

4、工作時(shí)間可由數(shù)字定時(shí)器控制，達(dá)到預(yù)定時(shí)間自動(dòng)轉(zhuǎn)變?yōu)榇龣C(jī)狀態(tài)，定時(shí)范圍1min～99min。

5、手持式超聲波細(xì)胞粉碎儀可人為自由控制工作和截止時(shí)間，使用靈活方便，適用于少量樣品的處理工作。