多肽常見問題匯總

來源：岐昱實業（上海）有限公司 2023年03月08日 14:30

關于多肽的一個常見的誤解是多肽像蛋白質一樣是不穩定的。事實上，多肽比蛋白質穩定得多，由于兩個影響蛋白質穩定性的要素不存在多肽合成中。這兩個要素是第三次折疊和蛋白酶的污染。

多肽只能經過共價修飾或者肽鍵斷裂被毀壞。不像蛋白質是從充溢各種蛋白酶的細胞里被純化，合成的多肽被蛋白酶污染的幾率是很小很小的。固拓生物在試驗中發現在中性pH條件下，大多數生物實驗的停止速度很慢。中性條件下細菌污染可能是一個嚴重的問題（由于多肽是細菌的一種良好的營養源）。因次，實驗里用到的溶劑過濾比多肽的穩定更重要。

多肽濃度

稱重和紫外線吸收力是兩個常用的辦法。

b. 紫外線吸收性。假如您的多肽含有一個或殘基，多肽的定量剖析就變得愈加簡單。

這在小的親水性肽，這不是問題。在水溶液中，這些肽通常采用伸展構象，一切的側鏈是完整暴露于溶劑中的。但關于長的疏水性多肽，固拓生物試驗發現這種假定是不完整正確的。有時可察看到低水平聚合和折疊。出于這個緣由，我們以為，在0.1N NaOH中，在293 nm處的吸光度是，由于在此條件下，肽是完整變性的。它的缺陷是，用于濃度測定的樣品不能被恢復。

基于上面的討論，為了多肽的濃度的準確測定，我們激烈倡議在你的多肽的N-或C-末端添加一個殘基。

人們經常以為用乙酰基和酰胺基分別阻斷肽的兩端能增加肽的穩定性，實踐上這是不正確的。

多肽溶解度

肽的溶解度最終取決于它的序列。在能夠操作的條件，pH值可能是最重要的。固拓生物發現，在許多狀況下，改動1-3個pH值單位能夠使十分穩定的多肽完整溶解。過渡曲線通常是很峻峭的。在一個很窄的pH范圍內，溶液從混濁變得明澈。這可能是由于某些殘基電離狀態的改動，比方His。

關于難以溶解的肽，你能夠在有機溶劑中制備更高濃度的原液，例如DMS，并且在生物功用檢測期間稀釋肽。大多數的檢測能包容1-2%的DSMO，一些以至是5%。但是這并不是總是起作用的。一些肽當從DMSO中稀釋時以至在更低濃度時匯集和沉淀。

▲岐昱多肽合成儀

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