聯(lián)用測(cè)定河水中的5種砷形態(tài)

砷被認(rèn)為是一種致癌物，廣泛存在于自然界中，長(zhǎng)期接觸會(huì)對(duì)人體造成危害。砷的毒性與其化學(xué)形態(tài)有關(guān)，不同價(jià)態(tài)、不同形態(tài)的砷其毒性差異很大。一般來(lái)說(shuō)，無(wú)機(jī)砷的毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于有機(jī)砷。

本文參考國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布的《GB 5009.11-2014 食品中無(wú)機(jī)砷的測(cè)定》，通過(guò)液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀，采用Hamilton PRP-X-100（250×4.1mm）陰離子色譜柱，用15mmol/L磷酸二氫銨及25mmol/L磷酸二氫銨（pH=8.0）作淋洗液，用梯度洗脫的方式測(cè)定了河水樣品中的五種砷形態(tài)，且加標(biāo)回收率良好，結(jié)果表明，該方法能夠快速準(zhǔn)確地進(jìn)行水質(zhì)樣品中的砷形態(tài)的分析。

測(cè)試原理

樣品溶液經(jīng)過(guò)前處理，由HPLC進(jìn)樣口進(jìn)樣，經(jīng)色譜柱分離，通過(guò)霧化器霧化后送入高溫等離子體中，干燥、原子化、電離，元素離子經(jīng)接口室進(jìn)入質(zhì)譜儀，通過(guò)離子透鏡系統(tǒng)、質(zhì)量分析器及檢測(cè)器，檢測(cè)器對(duì)相應(yīng)元素離子做出響應(yīng)（每秒離子計(jì)數(shù)cps（counts per second），經(jīng)軟件處理，響應(yīng)強(qiáng)度和時(shí)間組成的峰面積與相應(yīng)組分離子濃度成正比關(guān)系進(jìn)行定性定量分析。

實(shí)驗(yàn)部分

1實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑

液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀；

電子天平（BSA224S，賽多利斯）；

色譜柱（Hamilton PRP-X100，4.1×250mm，10μm）；

超純水系統(tǒng)（Millipore，電阻率為18.2MΩ·cm）；

氨水（優(yōu)級(jí)純，上海晶純?cè)噭┯邢薰荆?/p>

磷酸二氫銨（優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；

乙二胺四乙酸二鈉（優(yōu)級(jí)純，阿拉丁化學(xué)試劑）

5種砷形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)溶液（亞砷l酸根（GBW08666）、砷l酸根（GBW08667）、砷膽l堿（GBW08671）、一甲基砷（GBW08668）、二甲基砷（GBW08669），中國(guó)計(jì)量科學(xué)院）；

超聲波（KH-500E,昆山禾創(chuàng)）。

2樣品前處理

河水樣品經(jīng)0.45μm的水系濾膜直接過(guò)濾。

3流動(dòng)相及砷形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

15mmol/L NH4H2PO4溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取1.726g磷酸二氫銨，溶于1000 mL超純水中，經(jīng)0.45μm的水系濾膜過(guò)濾后，于超聲水浴中超聲脫氣30min。

25mmol/L NH4H2PO4溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取2.876g磷酸二氫銨，溶于1000 mL超純水中，用氨水調(diào)節(jié)PH至8.0，經(jīng)0.45μm的水系濾膜過(guò)濾后，于超聲水浴中超聲脫氣30min。

20mmol/L EDTA-2Na溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取0.745g乙二胺四乙酸二鈉，加入少量超純水，于150℃的電熱板上加熱至乙二胺四乙酸二鈉*溶解，冷卻后定容至100 mL的容量瓶中以待備用。

砷形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)溶液：

5種砷標(biāo)準(zhǔn)溶液采用20mmol/L EDTA-2Na按照梯度濃度的方式依次被稀釋為0.5µg/L、1.0µg/L、2.0µg/L、5.0µg/L、10.0µg/L、20.0µg/L 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時(shí)配制五種砷形態(tài)的5µg/L的單標(biāo)溶液以此來(lái)判別每種砷形態(tài)出峰時(shí)間。

4實(shí)驗(yàn)條件

4.1色譜條件

     色譜條件詳見(jiàn)表1和表2。

表1. HPLC分析條件

表2. 梯度洗脫條件

4.2質(zhì)譜條件

     ICP-MS分析條件見(jiàn)表3。

表3. ICP-MS分析條件

5實(shí)驗(yàn)結(jié)果

5.1色譜分離圖

按表2的洗脫條件，進(jìn)樣20.0µg/L砷形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，得到五種砷分離色譜圖，如圖2。AsC、As3+、DMA、MMA、As5+相對(duì)保留時(shí)間分別為120s、155s、247s、329s、583s，總分離時(shí)間約為600s。

圖2. 5種砷形態(tài)的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線

按照混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度0.5µg/L、1.0µg/L、2.0µg/L、5.0µg/L、10.0µg/L、20.0µg/L進(jìn)樣得到色譜圖，計(jì)算其峰面積，以濃度和峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999，結(jié)果詳見(jiàn)圖3-1~3-5。

5.3 檢出限

圖4為5.0µg/L混和標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，以各形態(tài)峰附近基線處的3倍信噪比（S/N)峰高對(duì)應(yīng)的濃度作為檢出限，AsC、As3+、DMA、MMA、As5+分別為0.078µg/L、0.10µg/L、0.11µg/L、0.13µg/L、0.16µg/L。

圖4. 5.0µg/L五種砷形態(tài)的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

5.4 測(cè)試結(jié)果

河水樣品及加標(biāo)1µg/L的測(cè)試結(jié)果詳見(jiàn)表4，樣品及加標(biāo)后砷形態(tài)疊加譜圖如圖5所示。

表4   樣品中各砷形態(tài)的測(cè)試結(jié)果

圖5. 河水樣及河水樣加標(biāo)1.0µg/L色譜圖

結(jié)論：利用LC-ICPMS聯(lián)用測(cè)試河水樣品中的五種砷形態(tài)，測(cè)試結(jié)果表明，該方法檢出限低、線性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上，樣品加標(biāo)回收率在87.8%-112.7%之間；同時(shí)五種砷形態(tài)能夠在600s內(nèi)完成分析，且分離度較好，此方法可滿(mǎn)足水質(zhì)樣品中砷的形態(tài)分析。