高效液相色譜儀在蛋白質(zhì)分離中的應(yīng)用

 作為生物大分子的蛋白質(zhì)，是一種長鏈高分子化合物，不僅分子量大，而且在溶液中的擴(kuò)散系數(shù)小、黏度大、易受外界溫度、酸度、有機(jī)溶劑的影響而并引起結(jié)構(gòu)變化。這增加了蛋白質(zhì)分離、分析的困難。
        蛋白質(zhì)在物理、化學(xué)及功能上的差異為蛋白質(zhì)的分離檢測提供了基礎(chǔ)。用高效液相色譜法來分析蛋白質(zhì)是一種近年來發(fā)展較快的新型分析方法。Bietz在1983-1984年就對用反相(RP)和尺寸排阻(SE)高效液相色譜來分離小麥蛋白質(zhì)和玉米蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行報(bào)導(dǎo)。由于高效液相色譜柱的改進(jìn)和HPLC技術(shù)的迅速發(fā)展，HPLC在蛋白質(zhì)分析研究中越趨成熟。
        HPLC分析蛋白質(zhì)不僅簡便快捷，而且選擇性好，分離效率高，檢測靈敏度高。HPLC的分離模式與檢測辦法多種多樣，根據(jù)蛋白質(zhì)的大小、形狀、電荷、疏水性、功能等特性，以及蛋白質(zhì)的來源、實(shí)驗(yàn)要求等，可以采用不同的色譜柱和檢測器來分離目標(biāo)蛋白。根據(jù)分離機(jī)理，蛋白質(zhì)的HPLC法可以分成尺寸排阻色譜（SEC），反相高效液相色譜(RP-HPLC)和凝膠滲透色譜(GPC)三大類。SEC 和RP-HPLC 兩種色譜分離模式構(gòu)成了蛋白質(zhì)分析的主流。

        HPLC法分離蛋白質(zhì)的不同模式，可對其他領(lǐng)域蛋白質(zhì)的研究提供強(qiáng)有力的手段。同時(shí)這些色譜柱和檢測器都存在各自的側(cè)重點(diǎn)，很難找到一種符合全部要求的理想的檢測器和色譜柱，所以利用HPLC法分離檢測蛋白質(zhì)的研究還會(huì)繼續(xù)，以發(fā)現(xiàn)更方便、快速、靈敏度更高，通用性更好的HPLC分析方法，推動(dòng)蛋白質(zhì)化學(xué)的發(fā)展。
        隨著HPLC聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用更加廣泛，無疑將進(jìn)一步促進(jìn)我國儀器的發(fā)展，對我國生命科學(xué)研究的發(fā)展和環(huán)境監(jiān)測都有重要意義。 
 

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