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    細菌基因組測序

    來源:北京百奧創(chuàng)新科技有限公司   2019年03月13日 10:58  

    產品介紹
    細菌基因組測序,可分為細菌基因組de novo測序和細菌基因組重測序兩類。細菌基因組de novo測序,即從頭測序是指不需要任何現有的序列信息就可以對某個細菌物種進行測序,利用生物信息學分析手段對序列進行拼裝,從而獲得該細菌物種的基因組序列。細菌基因組重測序是對已有參考序列(Reference Sequence)的物種的不同個體進行基因組測序,并以此為基礎進行個體或群體水平的差異性分析??申P注大量的單核苷酸多態(tài)性位點(SNP)、插入缺失(InDel, Insertion/Deletion)、結構變異(Structure Variation,SV)等變異信息。細菌基因組測序可以預測重要基因和蛋白以了解其功能和可能機制,已取代傳統(tǒng)方法成為研究細菌進化遺傳機制、關鍵功能基因的重要工具。

     
    根據不同的研究目的和需求,細菌基因組測序可具體分為以下產品: 
    細菌重測序
    構建小片段文庫,深度測序,基于已知參考基因組關注基因組變異情況(包括SNP和InDel等),可進行群體研究。 
    細菌denovo測序
    細菌框架圖:構建小片段文庫,采用高深度測序(100X)和初級的基因組從頭組裝策略,可滿足細菌基因組研究的基礎需求。 
    細菌精細圖:構建大片段和小片段文庫,采用高深度測序(150X)和針對性的基因組從頭組裝策略,是目前細菌基因組研究的主導產品。 
    細菌完成圖:根據待測菌株具體情況量身定制*策略,構建不同大小片段及類型文庫,綜合利用多種高通量測序技術及組裝技術,終組裝得到一條完整的基因組序列(1 Contig,0 gap),是細菌基因組測序從頭組裝的zui高標準。 
    流程圖
     
    結果示例
     

     

    案例分析
    案例:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)全基因組測序揭示其傳播機制及系統(tǒng)發(fā)育 
    Genome sequencing defines phylogeny and spread of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in a high transmission setting. Genome Res. 2015 January; 25(1): 111–118.
     
    耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)是一種常見的引發(fā)醫(yī)院內感染的致病菌,本研究對泰國東北部一家醫(yī)院分離出的79株菌進行了全基因組測序,繪制了該菌的系統(tǒng)發(fā)育樹,并發(fā)現了多個不同進化支,據此推理出感染病人之間的MRAS傳播途徑。
    技術參數

    產品

    測序策略

    交付指標

    周期

    細菌重測序

    HiSeq/MiSeq, 500bp文庫

    ≥100X

    40個工作日

    細菌框架圖

    HiSeq/MiSeq, 500bp文庫

    ≥100X

    35個工作日

    細菌精細圖

    HiSeq/MiSeq, 500bp+6K文庫

    ≥150X 
    (小片段100X, 大片段50X) 
    1-7M: Scaffold<25個 
    7-10M: Scaffold<45個

    45個工作日

    細菌完成圖

    多測序平臺及多類型文庫

    1 Contig, 0gap

    75個工作日

    樣品要求

    樣品類型

    檢測方法

    總量

    濃度

    其他要求

    DNA

    Qubit、AGE

    小片段文庫:≥ 1.5μg 
    大片段文庫:≥20μg 
    PCR-free :≥10μg

    小片段文庫: > 50ng/μL 
    大片段文庫: > 133 ng/μL 
    PCR-free : ≥30 ng/μL

    OD260/280= 1.8~2.0


    服務流程
    1、提交項目課題相關需求和資料。
    2、與我們的專業(yè)技術團隊討論項目細節(jié)。
    3、根據討論后的意見對實驗方案進行修改。
    4、雙方均滿意并達成一致,簽訂技術服務合同。
    5、開展實驗,按期完成合同規(guī)定的內容。
    6、結題,提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
    我們的優(yōu)勢
    1、適用于單細胞、微量細胞樣品。
    2、數據質量高、偏差小、高度均一。
    3、高通量,單個樣本可達30-100X的測序深度和數據產出量。
    4、*的覆蓋度,能檢測到90%以上的SNP位點信息。
    5、檢測靈敏度和準確度高。
    6、能夠全面發(fā)掘新的和稀有的遺傳變異
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