動物血清elisa試劑盒檢測結果不理想的原因是什么？

動物血清elisa試劑盒的檢測結果不理想，不知道是哪里出了問題。幫我看下是什么原因，我自己合成8個氨基酸的抗原短肽，和BSA耦連后免疫動物，1個月后用ELISA測定血清中針對抗原短肽的抗體滴度，具體步驟：用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板，4度冰箱18小時，再用1%OVA37度封閉2小時，洗板3次。待測血清用10%小牛血清倍比稀釋，37度溫育1小時，洗板3次，加入二抗，37度溫育40分鐘，洗板3次，加TMB顯色，結果比較詭異，陰性對照也顯色了，且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢？是洗板的問題嗎？
   將問題轉至技術部，專業技術員回應，ELISA結果不理想原因可以根據這幾個方面分析：
    1.洗板是否串孔，如串孔的話可能造成污染；您一抗、二抗每次洗板時洗5遍以上。
    2.封閉液的問題，你說陰性對照也顯色了，那zui主要的問題應該是封閉，應重新考慮用OVA封閉是否適合，如果OVA封閉效果不好的話可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關的帖，你搜一下看看。
    3.建議動物血清elisa試劑盒包被在37度兩小時，這樣的效果可能會好一些。
含量測定（HPLC）    琥珀酸*    對照品    100827-200501        100mg
HPLC法含量測定    *    對照品    100828-200501        100mg
HPLC法含量測定    萘磺酸*    對照品    100829-200501        100mg
含量測定（HPLC）    *    對照品    100840-200501        100mg
溶出度檢查    *    對照品    100841-200501        100mg
含量測定（HPLC）    鹽酸*    對照品    100842-200501        100mg
HPLC法含量測定    鹽酸氟*    對照品    100844-200501        100mg
HPLC法含量測定    *    對照品    100845-200501        100mg
含量測定    異喹啉物    對照品    100846-200501        100mg
含量測定（內標）    對羥基苯甲酸乙酯    對照品    100847-200501        100mg
動物血清elisa試劑盒