強推ELISA試劑盒檢測新原理

ELISA試劑盒檢測法是免疫確診中的一項新技術，現已成功地運用于多種病原微生物所致使的盛行癥、寄生蟲病及非盛行癥等方面的免疫確診。也已運用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，依據現已運用的效果，以為ELISA法具有活絡、特異、簡略、敏捷、安穩及易于自動化操作等特征。不只適用于臨床標本的查看，并且由于一天以內能夠查看幾百甚至上千份標本,因而，也適合于血清盛行病學查詢。本法不只能夠用來測定抗體，并且也可用于測定體液中的循環抗原，所以也是一種前期確診的超卓方法。因而ELISA法在生物醫學各領域的運用規劃日益擴展。
ELISA試劑盒檢測可概括四個方面：
A.?定量查看體液中抗原或抗體成份。
B.?研討抗酶抗體的構成。
C.?閃現微量的免疫沉淀反響。
D.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
ELISA試劑盒檢測中，進行各項試驗條件的挑選是很首要的，其間包括:
1）酶符號抗體作業濃度的挑選：首先用直接ELISA法進行開始效價的滴定（見酶符號抗體部份）。然后再固定其它條件或采用“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗系統里地滴定其作業濃度。
2）包被抗體（或抗原）的挑選：將抗體（或抗原）吸附在固相載體外表時，央求純度要好,吸附時一般央求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃ 18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不一樣的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相一同，查詢陽性標本的OD值。挑選OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。關于大都蛋白質來說一般為1～10μg/ml。
3）固相載體的挑選：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方法能夠是凹孔平板、試管、珠粒等。現在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體，在運用前均可進行挑選：用等量抗原包被，在同一試驗條件下進行反響，查詢其顯色反響是不是均一性，據此判明其吸附功用是不是超卓。