液相色譜法檢測*注射液有關物質(zhì)

操作簡便、快速，1本試驗采用液相色譜法測定*注射液中的有關物質(zhì)。測定結(jié)果準確可靠，從而能有效地控制該藥的質(zhì)量。2流動相的選擇上筆者比較了甲醇-水系統(tǒng)、乙腈-水系統(tǒng)、甲醇-磷酸鹽緩沖液系統(tǒng)、乙腈-磷酸鹽緩沖液系統(tǒng)等，發(fā)現(xiàn)*與有關物質(zhì)不能很好地分離，且色譜圖中主成分峰有明顯的脫尾現(xiàn)象，方法不合理。后來試加入醋酸緩沖液，結(jié)果能使*與有關物質(zhì)達到良好的分離，并消除了主峰脫尾現(xiàn)象。3主藥的稀釋溶劑選擇上，考慮到*易溶于水，筆者比擬了用流動相和水作為溶劑進行了檢測，發(fā)現(xiàn)兩種供試樣品的色譜圖中，主峰與有關物質(zhì)都能達到很好的分離，且檢測結(jié)果無明顯差異。為方便操作和節(jié)約成本，筆者選用純化水作為稀釋溶劑。

流速1.0ml/min檢測波長269nm進樣量20μl結(jié)果在該色譜條件下，摘要】目的建立液相色譜檢測*注射液有關物質(zhì)的方法。方法采用CromasilC18色譜柱（4.6mm150mm5μm以水-乙腈-醋酸緩沖液（pH6.1即取醋酸鈉10.92g加水100ml用冰醋酸調(diào)至pH6.158320.5為流動相。*注射液在5.3535.22μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系（r=0.9999n=5結(jié)論本法靈敏、準確、簡便，可作為*注射液有關物質(zhì)的檢測方法。

關鍵詞】*；注射液；有關物質(zhì)；液相色譜法

腫瘤組織內(nèi)受嘧啶核苷磷酸化酶的作用轉(zhuǎn)化為游離的5-氟*而顯示抗腫瘤作用。由于這種酶的活性在腫瘤組織內(nèi)較正常組織為高， *（Deoxifluridin為5-氟*的衍生物。且專一性強，故本品在腫瘤內(nèi)轉(zhuǎn)化速度快、濃度高，對腫瘤具有較高的選擇作用。臨床用于胃癌、大腸癌、乳腺癌、子宮頸癌、膀胱癌。*療效高，毒性小，一個具有特色的*的較好的抗癌藥。本研究采用HPLC法，建立了*注射液中有關物質(zhì)的測定方法。

1儀器與試藥

自動進樣器，Agilent1100液相色譜儀（四元泵。紫外檢測器，惠普色譜工作站，真空脫氣機）美國安捷倫公司）*對照品（江蘇省藥品檢驗所標定）含量99.6%供試品（自制，批號：060114060115060116甲醇（色譜純）其余試劑為分析純，水為超純水。

2方法與結(jié)果

*的保管時間約為4.3min理論板數(shù)不低于1000*與相鄰物質(zhì)峰的分離度大于1.52.1色譜條件色譜柱：DiamonsilC18液相色譜柱（4.6mm150mm5μm流動相：水-乙腈-醋酸緩沖液（pH6.1即取醋酸鈉10.92g加水100ml用冰醋酸調(diào)至pH6.158320.5流速：1.0ml/min檢測波長：269nm進樣量：20μl柱溫：25℃。上述色譜條件下。

用水稀釋制成約含*0.1mg/ml供試品溶液，2.2專屬性試驗精密量取*注射液適量。進樣20μl記錄色譜圖。另精密稱取*對照品適量，用水溶解并稀釋制成濃度為0.1mg/ml對照品溶液，進樣20μl記錄色譜圖。取空白溶劑水及流動相直接進樣20μl記錄色譜圖。由色譜圖可見，溶劑對*測定無干擾。

加水適量，2.3有關物質(zhì)線性關系試驗精密稱取于105℃干燥至恒重的*對照品約50mg于50ml量瓶中。振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml05ml依次置于25ml50ml100ml200ml200ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。精密量取各濃度溶液20μl注入液相色譜儀，記錄峰面積（A以峰面積A對濃度C進行線性回歸，得回歸方程為A=34581C+518.17r=0.9999n=5線性范圍為53535.22μg/ml

稀釋至約4μg/ml進樣20μl測定色譜系統(tǒng)基線。按信噪比為3測得*檢測限為36ng/ml2.4zui低檢測限取“線性關系”項下的對照品溶液。

精密稱定，2.5精密度試驗取*對照品適量。加水溶解并稀釋至約0.1mg/ml溶液，進樣20μl重復進樣6次，記錄色譜圖，結(jié)果峰面積的RSD為0.46%標明該溶液進樣精密度良好。

于室溫下放置0246810和12h后，2.6穩(wěn)定性試驗取上述精密度試驗項下的樣品溶液。分別進樣20μl峰面積的RSD為0.53%標明該溶液12h內(nèi)穩(wěn)定。

按處方比例加水制成80%120%共3種濃度的溶液，2.7回收率的測定精密稱取*對照品適量。按上述色譜條件測定。以加入量與測得量的比值，計算回收率。結(jié)果低、中、高3種濃度溶液的回收率分別為99.8%100.1%99.6%RSD分別為0.56%0.48%0.62%平均回收率（n=9為99.8%

加水稀釋至刻度，2.8*注射液中有關物質(zhì)的檢測精密量取*注射液適量（約相當于主藥25mg置于250ml量瓶中。搖勻，作為供試溶液；精密量取供試溶液1ml置于100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10%25%另精密量取上述兩種溶液各20μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰峰面積之和，不得大于對照溶液主峰面積1.0%

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