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    GFP標簽抗體使用指南

    來源:武漢艾美捷科技   2017年04月27日 16:30  

     

    GFP標簽抗體,抗GFP綠色熒光單抗,GFP小鼠源單克隆抗體

     

    Anti-GFP Tag Mouse Monoclonal Antibody (3D3)

     

    背景資料:GFP(:Green:Fluorescent:Protein,綠色螢光蛋白)是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea:victoria的水母中發(fā)現(xiàn)。其基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì),在藍色波長范圍的光線激發(fā)下,會發(fā)出綠色螢光。GFP標簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括細菌、酵母和哺乳動物細胞等,相應(yīng)的GFP標簽抗體也被廣泛應(yīng)用。一般來說,GFP抗體不僅可以檢測GFP或其適當?shù)耐蛔凅w,也可以檢測和GFP或其適當?shù)耐蛔凅w融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測GFP融合表達蛋白等。

     

     

    應(yīng)用類型:WB(1:1000-1:10,000)


    Fig.1.IP (1:200) - WB (1:5,000) analysis of GFP fusion protein expression in 293 cells. Input: Hela cell lysate (lane A) and IP product (lane B).

    Fig.2.WB (1:10,000) analysis of GFP fusion protein with Anti-GFP mouse monoclonal antibody (3D3) in 1:5,000 dilutions. 2ug GFP fusion protein (lane A) and 1 ug fusion protein (lane B).

     

    免疫原:KLH偶聯(lián)的全長GFP熒光蛋白

     

    來源宿主:小鼠

     

    反應(yīng)性:該GFP標簽抗體可識別天然或者變性的GFP,也可識別GFP變體如EGFP、YFP、EYFP和CFP等:

     

    保存建議:在發(fā)貨后能在-20℃保存1年。為zui大限度的避免損失,請在打開管蓋之前融化抗體并離心。建議使用前分裝以避免反復(fù)凍融,分裝后可在4℃保存1個月。

     

    如何選擇合適的GFP抗體?

     

    在選擇一個標簽抗體時,主要根據(jù)自己實驗應(yīng)用上的需要。這里需要考慮的因素包括,GFP抗體的應(yīng)用檢測類型、GFP抗體的克隆性及制備來源等。 比如 該GFP抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測?是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP實驗?是否需要特異性更好的單克隆GFP標簽抗體?一般來說,應(yīng)用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應(yīng)用時的稀釋比率。

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