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    間接法測抗體的幾大要點

    來源:上海晶抗生物工程有限公司   2017年04月05日 09:25  

     1.酶標抗抗體工作濃度的選擇

    (1)用100ng/ml人IgG進行包被,洗滌。

    (2)將酶標抗人IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中,保溫、洗滌。

    (3)加底物顯色。加酸終止反應后,讀取吸亮度(A),繪制曲線如圖15-10。讀取A值在1.0時的酶標抗體稀釋度,作為酶標抗體的工作濃度。該酶標抗人IgG的工作濃度應為1/1600。

    2.棋盤滴定法選擇包被抗原工作濃度

    (1)用包被液將抗原作一系列稀釋后進行包被,洗滌。

    (2)將強陽性參考血清、弱陽性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1:100稀釋,加樣,保溫,洗滌。

    (3)加按工作濃度稀釋的酶標抗人IgG抗體,保溫,洗滌。

    (4)加底物顯色。加酸終止反應后讀取A值。

    (5)選擇強陽性參考血清的A值為0.8左右、陰性參考血清的A值小于0.1的包被抗的的稀釋度作為工作濃度。表15-1為本例的測定結果,表中數字為A值。從表中可見1:200為zui舒適的工作濃度。

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