PCNA核內(nèi)參抗體WB實(shí)驗(yàn)的內(nèi)參解決方案

 增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen簡(jiǎn)稱(chēng)PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）患者的血清中發(fā)現(xiàn)并命名，因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質(zhì)，在細(xì)胞核內(nèi)合成，并存在于細(xì)胞核內(nèi)，為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細(xì)胞核內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)，因此其抗體被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞核蛋白的內(nèi)參抗體。

如何選擇合適的細(xì)胞核內(nèi)參抗體？

常用的細(xì)胞總蛋白質(zhì)內(nèi)參有GAPDH和細(xì)胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對(duì)于一些植物的樣本，則需要特別的植物Actin蛋白作為內(nèi)參。當(dāng)實(shí)驗(yàn)樣品中只是核蛋白，而不是細(xì)胞總蛋白提取液時(shí)，可以用組蛋白H（Histone H），或者增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）等為核內(nèi)參抗體。除了這些，其它常見(jiàn)的核蛋白內(nèi)參還有K70, K80, Lamin A和B，在一些文獻(xiàn)報(bào)道中，Erk2、TATA binding protein（TBP）以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的問(wèn)題是核蛋白內(nèi)參的選擇需要考慮實(shí)際的試驗(yàn)環(huán)境，比如在涉及細(xì)胞增殖相關(guān)試驗(yàn)中，c-Jun由于自身表達(dá)變化就不適合做內(nèi)參；而在凋亡實(shí)驗(yàn)時(shí)，TBP、Lamin等也不適合作為內(nèi)參。

另外，我們還需要根據(jù)目的蛋白的大小選擇合適的核內(nèi)參，我們推薦內(nèi)參要與檢測(cè)的目的蛋白的分 子量相差5KD以上，因此你需要根據(jù)你目的檢測(cè)蛋白的分子量來(lái)選擇合適的內(nèi)參。PCNA的檢測(cè)分子量大約在28kD，而Histone H3的檢測(cè)條帶大約在18kD，因此PCNA比較適合用于檢測(cè)目標(biāo)蛋白在較大的WB實(shí)驗(yàn)，而Histone H3則不適合用于13kD-23kD大小的目的蛋白內(nèi)參。另外，雖然PCNA是zui合適的核內(nèi)參抗體之一，但是在某些條件下，一些影響增殖的因素會(huì)導(dǎo)致樣品間PCNA含量的變化，就不適合作為內(nèi)參。

一開(kāi)始購(gòu)買(mǎi)Abbkine的PCNA抗體是用來(lái)做WB的，效價(jià)挺高的。后來(lái)我們使用了組織塊作為樣品做共定位，我嘗試使用該抗體對(duì)PCNA做定位，做免疫組織化學(xué)，WB和IHC效果都很不錯(cuò)。——中南民族大學(xué)生科院一客戶(hù)

另外，我們還需要考慮自己的需要，特別是實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。一般來(lái)說(shuō)，應(yīng)用類(lèi)型越多，在使用過(guò)程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價(jià)都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外，抗體的效價(jià)也是考察該抗體性?xún)r(jià)比的重要方面，也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時(shí)的稀釋比率。一個(gè)效價(jià)高的100μl PCNA抗體（假如其WB檢測(cè)的稀釋比率是1:5000，zui終使用液相當(dāng)于500ml），要比效價(jià)低的1ml的PCNA抗體（假如WB檢測(cè)的稀釋比率是 1:200，zui終使用液相當(dāng)于2ml）性?xún)r(jià)比更高。因此在選擇抗體的時(shí)候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價(jià)，即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。

為什么選擇推薦Abbkine品牌的PCNA抗體？

供應(yīng)PCNA抗體的品牌是比較多的，象Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling、Sigma，甚至于Millipore、R&D、Novus、BD等都有相應(yīng)的產(chǎn)品。下面是幾個(gè)進(jìn)口品牌的簡(jiǎn)單比較：

另外，一些國(guó)內(nèi)的供貨商也能提供分裝的PCNA抗體，但是在品牌和質(zhì)量保障上都有不足。國(guó)產(chǎn)分裝的PCNA抗體在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足，并且經(jīng)過(guò)分裝以后，其效價(jià)也有損失。而原產(chǎn)于國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的PCNA抗體有些具有較好的檢測(cè)活性，但是在應(yīng)用類(lèi)型上有差距，并且在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制，而國(guó)內(nèi)僅有的少量原產(chǎn)抗體也是多克隆抗體。如果您想買(mǎi)到一支性?xún)r(jià)比更高，同時(shí)也是*品牌的PCNA核內(nèi)參抗體，那Abbkine可能會(huì)是您的一個(gè)重要考慮選項(xiàng)之一。我們向您推薦Abbkine的PCNA核內(nèi)參抗體Anti-PCNA Monoclonal Antibody (1D7)（貨 號(hào)A01040）。

該抗體單克隆抗體，克隆號(hào)為1D7。其抗原為人PCNA蛋白中兼具特異性和保守的一段序列，可用于小鼠、人以及大鼠樣本的WB內(nèi)參。另外，該抗體的效價(jià)非常高，WB實(shí)驗(yàn)推薦稀釋比率為1:1000-1:10,000，甚至有客戶(hù)報(bào)告更高的稀釋比率。

該P(yáng)CNA內(nèi)參抗體免疫組織化學(xué)的效果也很不錯(cuò)，是一款非常適合做免疫組化對(duì)細(xì)胞骨架進(jìn)行染色定位的抗體產(chǎn)品。另外，也有客戶(hù)報(bào)告使用該抗體用于組織的熒光染色，也取得了意外的效果。

Abbkine還提供大包裝1ml以及更大規(guī)格定制的PCNA標(biāo)簽抗體，非常適合經(jīng)常進(jìn)行內(nèi)參驗(yàn)證或校準(zhǔn)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)需求。為方便客戶(hù)的使用， 上述產(chǎn)品，Abbkine均在中國(guó)備有現(xiàn)貨。Abbkine針對(duì)中國(guó)市場(chǎng)，提供化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障，如果您在使用過(guò)程中有任何問(wèn)題， 請(qǐng)直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰尽?/p>

美國(guó)Abbkine品牌是一家提供高性?xún)r(jià)比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌，艾美捷將其引入中國(guó)，作為其中國(guó)區(qū)域代理，將為客戶(hù)提供性 價(jià)比的常規(guī)免疫學(xué)試劑，如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗，抗體檢測(cè)底物以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家品牌的的中國(guó)代理或 區(qū)域代理，艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，請(qǐng)致電免費(fèi)客戶(hù)專(zhuān)線到艾美捷科技有限公司垂詢(xún)相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。