液相色譜法分析中藥及植物藥的進展(2)

果甙 、小檗堿、黃芩甙、 次黃芩素和甘草酸〔28〕。表2中列出了近年來為分析中藥制劑中的活性組分開發的HPLC方法。

3.3　生物樣品
　
　為了安全、合理、有效地使用藥物，需要了解藥物體內過程的信息，藥代動力學研究藥物及其制劑的體內過程（吸收、分布、代謝、排泄）、作用機理及藥物效應。建立藥物藥代動力學模型的先決條件是開發出能夠準確測定藥物母體化合物及其代謝產物在各種體液中的濃度，分析的質量則取決于方法的有效性和樣品設計，如：取樣數目、時間間隔、取樣體積等。由于HPLC的選擇性好，自動化程度高，分析時間短等優點，多數實驗和臨床的藥代動力學研究都采用這一分析方法。

    樣品制備在HPLC的生物樣品分析中是關鍵性的一步，其主要目的是：（1）將待分析物與蛋白質分離；（2）去除影響分析物保留和定量準確度的干擾物質；（3）濃縮待分析物以提高檢測的靈敏度和檢測限。生物樣品包括體液（血清、血漿、全血、尿等）、組織液和其它樣品。經典的樣品預處理方法包括蛋白質沉淀和萃取。液液萃取是zui常用的樣品預處理方法，它能起到樣品凈化（去除干擾化合物）和去除蛋白質（將分析物從蛋白質基質中分出）的雙重作用。沉淀方法中，沉淀劑（有機改性劑、鹽、酸，如：三氯乙酸、高氯酸、鎢酸、偏磷酸）被加到樣品中，通過離心將沉淀除去，此方法的缺點是大大增加了分析時間，同時由于分析物在沉積蛋白質上的吸附而降低了回收率〔29〕。在生物樣品分析中，直接進樣技術在節約時間和勞力方面顯示出了相當大的*性。現已有幾種直接進樣方法，如柱切換、直接進樣固定相、膠束色譜等〔30〕。為了研究中藥的藥代動力學，Homma和Oka建立了一個測定尿樣中厚樸、8,9-二羥基-二氫木蘭醇、medicarpin、甘草素、黃芩甙元、 次黃芩素、木蝴蝶素A和二羥苯基羥基苯酮等8個組分的HPLC方法。樣品經葡糖苷酸酶酶解后，分出親油性組分, 在正相柱上鑒定厚樸，在反相柱上鑒定其它組分〔31〕。異鉤藤堿是傳統中藥鉤藤的主要生物堿，有降低血壓等效應。黃等〔32〕用乙醚萃取兔血漿，在ODS 柱上，以甲醇-水（95∶5,V/V）為流動相，建立了兔血漿中異鉤藤堿濃度的HPLC方法。血藥濃度在0.016～16 mg/L 范圍內呈線性關系，血漿zui低檢測濃度為0.016 mg/L，回收率為80.5%～85.1%。另有報道〔33〕，分別用乙醚和氯仿-異丙醇（4∶1,V/V）處理人血清和尿液，HPLC分析，*在體內的藥代動力學過程符合二室開放模型，體內消除符合一級動力學消除過程。葉等〔34〕開發了測定血漿、尿及各種組織液中的淫羊藿甙的HPLC方法，此方法用乙酸乙酯萃取樣品，已用于淫羊藿甙的藥代動力學研究。用乙醚萃取犬血漿、小鼠組織、體液中的*，HPLC分析，獲得了一些藥代動力學參數．