His標(biāo)簽抗體錯誤問題集錦

His標(biāo)簽是由6個*（His-His-His-His-His-His）組成的短肽,專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小，并且較容易分離和純化，His-tag 融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢, 是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用的一種。His抗體可以用于檢測和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位，以及純化、定性或定量檢測His融合表達(dá)蛋白等。然而，目前商品化His-tag的單克隆抗體（mAb）種類不多, 且價格也十分昂貴。

如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體？

我們在選擇His抗體時，主要根據(jù)自己的需要，特別是實驗應(yīng)用上的需要。其中需要考慮的因素包括了，His抗體的應(yīng)用檢測類型、His抗體的克隆性及制備來源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測？是否可以用于免疫熒光IF實驗？我是否需要特異性更好的單克隆His標(biāo)簽抗體？我是否需要考慮下是選擇小鼠來源的還是兔來源的His抗體？

之前有使用SSS（一家品牌的His標(biāo)簽抗體，名稱隱去）的His標(biāo)簽抗體，一開始還好，過了半年后，就發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定，做IF實驗不行了，后來試用了下Abbkine的，IF結(jié)果很漂亮，順帶還買了他們的DyLight熒光二抗 —— 廣州南方醫(yī)科大學(xué)一客戶

一般來說，應(yīng)用類型越多，在使用過程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當(dāng)于實際應(yīng)用時的稀釋比率。一個效價高的100μl His抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:5,000，終使用液相當(dāng)于500ml），要比效價低的1ml的His抗體（假如WB檢測的稀釋比率是 1:200，終使用液相當(dāng)于2ml）性價比更高。因此在選擇抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。

為什么推薦Abbkine品牌的His抗體？

供應(yīng)His抗體的進(jìn)口品牌有很多，包括Sigma、Novagen、Qiagen、Abcam等，其中Abcam有一款值得推薦的His抗體，品名為6X His tag® antibody [HIS.H8] （貨號為：ab18184），該抗體是Abcam推薦的*5His標(biāo)簽抗體，可用于IF/ICC、IP以及WB實驗，截止到2013年，使用該抗體發(fā)表在NCBI統(tǒng)計的文章有16篇（詳情請點擊：6X His tag® antibody [HIS.H8]）。該抗體為單克隆抗體，克隆號為HIS.H8，該抗體2013年的中國報價為￥4418/100μl。Abcam的抗體在品牌度、質(zhì)量以及售后方面都是很值得推薦的，然后其價格較高。

在此，我們向您推薦Abbkine的His標(biāo)簽抗體，Anti-His Tag Monoclonal Antibody （5C3）（貨號A02050），該抗體實際上與上述Abcam抗體來源相同。與Abcam一樣，其免疫原是6x His合成多肽，可識別可識別His重組蛋白和在細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)的His標(biāo)記重組蛋白。然而其價格比Abcam低65%以上。Abbkine作為美國一家生產(chǎn)型品牌，為多個品牌提供OEM服務(wù)，因此其價格低廉，其質(zhì)量也經(jīng)受過市場檢驗。該抗體可以用于Western Bloting、免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫熒光ICC/IF和免疫沉淀IP實驗等多種不同應(yīng)用。

一個價的抗體不僅影響實驗結(jié)果的靈敏度，還意味著更高的性價比。Abbkine的His標(biāo)簽抗體在常規(guī)的WB實驗里，推薦的起始稀釋比率為1:1000，實際在Abbkine的應(yīng)用中，還有1:4,000甚至更高的稀釋比率，需要根據(jù)客戶具體的實驗條件進(jìn)行優(yōu)化。該抗體在免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫熒光ICC/IF中同樣表現(xiàn)，5C3克隆的His標(biāo)簽抗體識別的免疫決定簇非常適合ICC/IF的應(yīng)用。IP免疫沉淀反應(yīng)也是客戶選擇Abbkine的一個重要原因。另外，Abbkine還同時提供經(jīng)HRP偶聯(lián)的His標(biāo)簽抗體，尤其適合IP-WB驗證時去除二抗的干擾；兔源多克隆His抗體也為客戶提供另一種His標(biāo)簽的檢測方案。

Abbkine還提供大包裝1ml的His標(biāo)簽抗體，非常適合經(jīng)常進(jìn)行His標(biāo)簽系統(tǒng)免疫學(xué)檢測的實驗需求。為方便客戶的使用， 上述產(chǎn)品，Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場，提供化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障，如果您在使用過程中有任何問題， 請直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰尽?/p>

美國Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌，艾美捷將其引入中國，作為其中國區(qū)域代理，將為客戶提供性 價比的常規(guī)免疫學(xué)試劑，如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗，抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時我們作為多家品牌的的中國代理或 區(qū)域代理，艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣，請致電免費客戶專線轉(zhuǎn)801/802/803  或者/4876到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實驗解決方案