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  • 北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
    初級(jí)會(huì)員 | 第8年

    15522676233,13366620421

    化學(xué)試劑
    AdVnt
    vmrd
    Serochem
    Affymetrix
    Agela Technologies
    Ahram Biosystems
    AIM Biotech
    MRC Holland
    Alba Bioscience
    aldevron
    Ambion全國(guó)代理
    Advanced Cell Diagnostics
    Ace Glass
    Acris
    AcroBiosystems
    American Screening
    Bio-Gene
    TLC PharmaChem
    vacuubrand
    Valley Biomedical
    vasQtec
    VistaLab
    Visual Protein
    Vitatex
    vivantis
    Vysis
    Xenometrix
    3Helix
    Ab Peptides
    Abaxis
    Abberior
    Abbomax
    ABclonal
    Abgent
    Abiocode
    A-M Systems
    Biohit
    Glycotech
    Antigen America
    chairalix
    InGex
    MyBiosource
    ProQinase
    Atlas Link
    EPC
    Alpco
    Vienna
    Qz biosciences
    Hycult Biotech
    Serion
    Electron Microscopy Sciences
    IQ products
    Affinity
    ProZyme
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    Alexis
    Alomone Labs
    NEB
    ChemGenes
    rPeptide
    Alta Diagnostic
    Altromin
    Alzet
    American Diagnostica
    ampolymer
    Acris全國(guó)代理
    Acros Organics
    Adámas Nano
    AddexBio
    Ademtech
    ADS Biotec
    Advance Tabco
    Contipro
    Fluidigm
    One Lambda
    XenoTech
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    zsbio
    REPROCELL
    Surmodics
    BioLegend
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    G-Bioscience
    ProSci Incorporated
    QED Bioscience
    RAN Biotechnology
    Cytoskeleton
    Aves Labs
    Synaptic Systems
    Aline
    Wako
    Atto-tec
    IMD
    Permagen
    Qiagen
    emfret
    Myriad
    Sciex
    Scripps
    AG Scientific
    Advanced ChemTech
    Aqix
    Arista Biologicals
    Array Bridge
    AscentGene
    Astarte Biologics
    Asuragen
    ATCC
    Atlas Antibodies
    Avantor®
    Avidity
    Cape Cod
    Bioptechs
    biosupply
    Biotest
    BioThema
    Biotools
    BioVectra
    BioVendor
    Biovision
    BlueGene
    Boekel Scientific
    Bovogen Biologicals
    American Elements
    Appolon Bioteck
    數(shù)字PCR突變檢測(cè)
    熒光定量PCR
    DNA修飾標(biāo)記探針合成服務(wù)
    Starlab
    凝膠遷移實(shí)驗(yàn)(EMSA)
    Western Blot (蛋白印跡)
    FISH熒光原位雜交技術(shù)
    實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
    流式細(xì)胞檢測(cè)
    細(xì)胞STR鑒定
    細(xì)胞凋亡
    細(xì)胞端粒酶活性分析
    細(xì)胞端粒長(zhǎng)度檢測(cè)
    細(xì)胞免疫熒光
    細(xì)胞培養(yǎng)
    細(xì)胞遷移能力檢測(cè)
    細(xì)胞染色體核型分析
    細(xì)胞增殖檢測(cè)(MTT檢測(cè))
    外周血游離線粒體DNA含量測(cè)定
    ATP含量檢測(cè)
    線粒體mtDNA拷貝數(shù)檢測(cè)
    蛋白表達(dá)與純化
    蛋白結(jié)構(gòu)研究
    同工酶活性分析
    藥物分析技術(shù)服務(wù)
    藥物篩選
    藥效毒理分析
    小動(dòng)物活體成像
    動(dòng)物實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
    CRISPR-CAS9基因編輯
    生物信息分析
    整體課題外包服務(wù)
    Masson染色(膠原纖維染色法)
    甲苯胺藍(lán)染色
    ELISA酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)
    免疫共沉淀
    病理切片以及HE染色
    Alere
    Anadis
    Ancare
    Ancell
    Aniara Diagnostica
    Antibodies Incorporated
    AntibodyChain
    AntiCancer
    Antigenix America
    Aobious
    Chromogenix
    GeneProof
    Kerry
    Decon Labs
    ImmuQuest
    Duran
    Axxora
    Bachem
    Abitec
    ABL,Inc
    ABM
    ABMI
    Abp
    Abways
    accu-chek
    Diagnostics
    Accurate chemical
    Cellscript
    Salimetrics
    Candor
    MasterTech Scientific Incorporated
    Arrayit
    BePure
    BioLumix
    BIOTANG
    Celetrix LLC
    Boston Cellron
    Enquire
    Badrilla授權(quán)代理
    bangs授權(quán)代理
    BBI授權(quán)代理
    BellBrook
    Berthold
    Bertin
    Binitio
    Celex
    Cellagen
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    Cell Marque
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    Frontier Specialty Chemicals
    TCI
    Firegen凡知醫(yī)療
    Takara

    基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展

    時(shí)間:2023/10/13閱讀:481
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    基因測(cè)序是通過(guò)對(duì)生物體的核酸序列進(jìn)行檢測(cè),從而在分子和基因?qū)用鎸?shí)現(xiàn)對(duì)生物體的進(jìn)階分析與解讀。對(duì)于人類而言,究其根本都含有23對(duì)染色體、2.5萬(wàn)個(gè)基因編碼、30億個(gè)堿基對(duì)組成的bio-data綜合體。測(cè)序技術(shù)的不斷進(jìn)步使人類可以破解生命的密碼,是分子生物學(xué)迅速發(fā)展的強(qiáng)大推動(dòng)力之一。近半世紀(jì)以來(lái)隨著基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展不斷有所突破,該技術(shù)也由初始的一代測(cè)序發(fā)展到四代測(cè)序,那么接下來(lái)一起來(lái)學(xué)習(xí)一下基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展歷程吧!

    一代測(cè)序

    一代測(cè)序是上世紀(jì)70年代由Sanger和Coulson開創(chuàng)的DNA雙脫氧鏈終止法測(cè)序,也稱為Sanger測(cè)序。在1977年完成第一個(gè)基因組序列(噬菌體X174),全長(zhǎng)共計(jì)5375個(gè)堿基。2001年完成的第一個(gè)人類基因組圖譜就是以改進(jìn)了的Sanger法為其測(cè)序基礎(chǔ)。

    Sanger測(cè)序原理:在4個(gè)DNA合成反應(yīng)體系(含dNTP)中分別加入一定比例帶有標(biāo)記的ddNTP(分為:ddATP、ddCTP、ddGTP和ddTTP),通過(guò)凝膠電泳和放射自顯影后可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測(cè)分子的DNA序列。由于ddNTP的2’和3’都不含羥基,其在DNA的合成過(guò)程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以用來(lái)中斷DNA合成反應(yīng)。

    一代測(cè)序雖然準(zhǔn)確度十分高,且該技術(shù)在當(dāng)下依然被廣泛應(yīng)用(比如構(gòu)建載體做克隆,基因敲除等實(shí)驗(yàn)都可以用到),但是通量太低,所以對(duì)于大片段或者全外顯子等非常耗時(shí),且很多情況下成本較高。

    二代測(cè)序

    二代測(cè)序技術(shù),又稱為Next Generation Sequencing(NGS)技術(shù),是為了改進(jìn)一代測(cè)序通量過(guò)低的問(wèn)題而出現(xiàn)的,能夠同時(shí)對(duì)上百萬(wàn)甚至數(shù)十億個(gè)DNA分子進(jìn)行測(cè)序,實(shí)現(xiàn)了大規(guī)模、高通量測(cè)序的目標(biāo)。二代測(cè)序技術(shù)在大幅提高了測(cè)序速度的同時(shí),還大大地降低了測(cè)序成本,并且保持了高準(zhǔn)確性,以前完成一個(gè)人類基因組的測(cè)序需要3年時(shí)間,而使用二代測(cè)序技術(shù)則僅僅需要1周,但其序列讀長(zhǎng)方面比起第一代測(cè)序技術(shù)則要短很多,大多只有100bp-150bp。二代測(cè)序技術(shù)雖然通量很高,但是讀長(zhǎng)實(shí)在太短,主流的Illumina測(cè)序儀,常規(guī)模式只能測(cè)PE150的長(zhǎng)度,靠著軟件算法上的進(jìn)步才得以可用。由此三代測(cè)序走上了歷史舞臺(tái)。

    三代測(cè)序

    三代測(cè)序主要有兩種技術(shù):SMRT和Oxford Nanopore Technologies的納米孔單分子測(cè)序技術(shù),這兩種技術(shù)的測(cè)序讀長(zhǎng)都可以達(dá)到幾十kb的級(jí)別,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于二代測(cè)序技術(shù)。與前兩代相比,他們最大的特點(diǎn)就是單分子測(cè)序,測(cè)序過(guò)程無(wú)需進(jìn)行PCR擴(kuò)增。SMRT技術(shù)的測(cè)序速度很快,每秒約10個(gè)dNTP。但這么快的測(cè)序速度也帶來(lái)了一些明顯的缺點(diǎn)——測(cè)序錯(cuò)誤率比較高(這幾乎是目前單分子測(cè)序技術(shù)的通病),可以達(dá)到10%-15%,而且以隨機(jī)的缺失序列和錯(cuò)位居多。

    四代測(cè)序-納米孔測(cè)序

    四代測(cè)序是將在某一面上含有一對(duì)電極的特殊脂質(zhì)雙分子層置于一個(gè)微孔之上,該雙分子層中含有很多由α溶血素蛋白組成的納米孔(直徑2.6nm),只能容納一個(gè)核苷酸通過(guò),并且每個(gè)納米孔會(huì)結(jié)合一個(gè)核酸外切酶。當(dāng)DNA模板進(jìn)入孔道時(shí),孔道中的核酸外切酶會(huì)“抓住"DNA分子,順序剪切掉穿過(guò)納米孔道的DNA堿基,每一個(gè)堿基通過(guò)納米孔時(shí)都會(huì)產(chǎn)生一個(gè)阻斷,根據(jù)阻斷電流的變化就能檢測(cè)出相應(yīng)堿基的種類,從而進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)序,最終得到DNA分子的序列。以O(shè)xford Nanopore Technologies為代表的納米孔測(cè)序技術(shù)與其他測(cè)序技術(shù)不同的是,它基于電信號(hào)而不是光信號(hào)。經(jīng)歷了三個(gè)主要的技術(shù)革新:一、單分子DNA從納米孔通過(guò);二、納米孔上的酶對(duì)于測(cè)序分子在單核苷酸精度的控制;三、單核苷酸的測(cè)序精度控制。

    以上就是關(guān)于基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展歷程,如果你有更多問(wèn)題請(qǐng)咨詢百奧創(chuàng)新客服哦!


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