• <del id="qqie6"><sup id="qqie6"></sup></del>
  • <tfoot id="qqie6"></tfoot>
  • <ul id="qqie6"></ul>
  • 北京百奧創新科技有限公司
    初級會員 | 第8年

    15522676233,13366620421

    化學試劑
    AdVnt
    vmrd
    Serochem
    Affymetrix
    Agela Technologies
    Ahram Biosystems
    AIM Biotech
    MRC Holland
    Alba Bioscience
    aldevron
    Ambion全國代理
    Advanced Cell Diagnostics
    Ace Glass
    Acris
    AcroBiosystems
    American Screening
    Bio-Gene
    TLC PharmaChem
    vacuubrand
    Valley Biomedical
    vasQtec
    VistaLab
    Visual Protein
    Vitatex
    vivantis
    Vysis
    Xenometrix
    3Helix
    Ab Peptides
    Abaxis
    Abberior
    Abbomax
    ABclonal
    Abgent
    Abiocode
    A-M Systems
    Biohit
    Glycotech
    Antigen America
    chairalix
    InGex
    MyBiosource
    ProQinase
    Atlas Link
    EPC
    Alpco
    Vienna
    Qz biosciences
    Hycult Biotech
    Serion
    Electron Microscopy Sciences
    IQ products
    Affinity
    ProZyme
    Synthose
    Alexis
    Alomone Labs
    NEB
    ChemGenes
    rPeptide
    Alta Diagnostic
    Altromin
    Alzet
    American Diagnostica
    ampolymer
    Acris全國代理
    Acros Organics
    Adámas Nano
    AddexBio
    Ademtech
    ADS Biotec
    Advance Tabco
    Contipro
    Fluidigm
    One Lambda
    XenoTech
    ZenBio
    zsbio
    REPROCELL
    Surmodics
    BioLegend
    DRG
    Echelon
    ProImmune
    ProMab
    G-Bioscience
    ProSci Incorporated
    QED Bioscience
    RAN Biotechnology
    Cytoskeleton
    Aves Labs
    Synaptic Systems
    Aline
    Wako
    Atto-tec
    IMD
    Permagen
    Qiagen
    emfret
    Myriad
    Sciex
    Scripps
    AG Scientific
    Advanced ChemTech
    Aqix
    Arista Biologicals
    Array Bridge
    AscentGene
    Astarte Biologics
    Asuragen
    ATCC
    Atlas Antibodies
    Avantor®
    Avidity
    Cape Cod
    Bioptechs
    biosupply
    Biotest
    BioThema
    Biotools
    BioVectra
    BioVendor
    Biovision
    BlueGene
    Boekel Scientific
    Bovogen Biologicals
    American Elements
    Appolon Bioteck
    數字PCR突變檢測
    熒光定量PCR
    DNA修飾標記探針合成服務
    Starlab
    凝膠遷移實驗(EMSA)
    Western Blot (蛋白印跡)
    FISH熒光原位雜交技術
    實驗技術服務
    流式細胞檢測
    細胞STR鑒定
    細胞凋亡
    細胞端粒酶活性分析
    細胞端粒長度檢測
    細胞免疫熒光
    細胞培養
    細胞遷移能力檢測
    細胞染色體核型分析
    細胞增殖檢測(MTT檢測)
    外周血游離線粒體DNA含量測定
    ATP含量檢測
    線粒體mtDNA拷貝數檢測
    蛋白表達與純化
    蛋白結構研究
    同工酶活性分析
    藥物分析技術服務
    藥物篩選
    藥效毒理分析
    小動物活體成像
    動物實驗項目
    CRISPR-CAS9基因編輯
    生物信息分析
    整體課題外包服務
    Masson染色(膠原纖維染色法)
    甲苯胺藍染色
    ELISA酶聯免疫吸附檢測
    免疫共沉淀
    病理切片以及HE染色
    Alere
    Anadis
    Ancare
    Ancell
    Aniara Diagnostica
    Antibodies Incorporated
    AntibodyChain
    AntiCancer
    Antigenix America
    Aobious
    Chromogenix
    GeneProof
    Kerry
    Decon Labs
    ImmuQuest
    Duran
    Axxora
    Bachem
    Abitec
    ABL,Inc
    ABM
    ABMI
    Abp
    Abways
    accu-chek
    Diagnostics
    Accurate chemical
    Cellscript
    Salimetrics
    Candor
    MasterTech Scientific Incorporated
    Arrayit
    BePure
    BioLumix
    BIOTANG
    Celetrix LLC
    Boston Cellron
    Enquire
    Badrilla授權代理
    bangs授權代理
    BBI授權代理
    BellBrook
    Berthold
    Bertin
    Binitio
    Celex
    Cellagen
    Talen
    CellGenix
    Toxin
    Cell Guidance Systems
    Cell Marque
    CELLTREAT
    Celprogen
    Chem-Impex
    CheMatech
    ChemBridge
    Click chemistry tools
    Cohesion
    Covaris
    CPAchem
    Creative Biogene
    Liposoma
    ChemPep
    Chemsavers
    Chemsigma
    Chimerigen
    Chimerx
    chinese peptide
    Citeq Biologics
    Clare Chemical
    Dianova
    MedKoo
    Diasorin
    Diversified Biotech
    DLD Diagnostics GmbH
    Dual Manufacturing
    Dualsystems Biotech
    Duchefa
    Echemshop
    EdgeBio
    EIAab
    EMP Genetech
    Empire Genomics
    Encorbio
    Enogene
    Envirologix
    Epicentre
    EpiCypher
    Equitech-Bio
    Equl
    Moltox
    Hyglos
    Hypermol
    Hypoxyprobe
    IBA
    ibidi
    ICPbio
    ICT
    Immundex
    Glycan Therapeutics
    Immunology Consultants Laboratory
    Lifeline
    Codex
    DNA Polymerase Technology
    CT International
    EZBioscience
    Cyanotec
    NeoScientific
    Demeditec
    Public Health England
    Expedeon
    Grace Bio-Labs
    GroPep
    Haematologic
    Hampton
    Helena
    Helica
    ESI BIO
    Etonbio
    Eurogentec
    Euroimmun
    EuroProxima
    Everest Biotech
    Exalpha
    Abingdon
    eneka
    Fabgennix
    Favorgen
    FD NeuroTechnologies
    Fermentek
    Firalis
    Fluorochem
    Fortebio
    FST
    Fuji Silysia Chemical
    Gene tools
    Genentech
    Alstem
    Genisphere
    Genovis
    GenScript
    Gentaur
    GenWay
    Gilson
    Glen Research
    ICL
    Inalco SpA
    Inlell
    Instech
    Intellicyt
    Cryogenics
    InvivoChem
    Jai Radhe Sales
    Jena Bioscience
    CliniSciences
    GenTegra
    Isogen
    ECO-TEK
    BioSite
    Anshlabs
    RCA-Separations
    Synchem
    DiaPharma
    OriMAbs
    Tonbo
    WiseGene
    Integral Molecular
    NonInvasive
    Norland
    Novoprotein
    Tecan
    Oxford
    Iwai
    King BioMedical
    LC Sciences全國代理
    lectinity
    LGM Pharma
    Life Diagnostics
    Lumafluo
    Lymphotec
    MatTek
    MCE
    Medical Isotopes
    Meliorum
    MetaSystems
    Microgen
    Micropoint
    Elitech
    molecular devices
    Molecular Dimensions
    Biosearch
    Macrocyclics
    Mypols
    Nacalai Tesque
    nanoComposix
    Nanocs
    Nanolight
    Neogen
    Nexcolm
    Niomech
    Sanbio
    CoaChrom
    Rieke
    Roboz
    Rossix
    SAI
    oetltd
    OlChemIm
    Organotechnie
    Orgentec
    Panagene
    PANATecs
    Panpath
    Poly Scientific
    Polymer Source
    Progen
    Proliant Biologicals
    Quantimetrix
    QuickZyme
    Randox
    Rapidtest
    RD-Biotech
    registech
    Rel Assay Diagnostics
    Relia
    Repligen
    Restek
    RevMAb
    Fujifilm
    ScheBo
    Schott
    SCICONS
    Sekisui
    Sero
    Serva
    Shenandoah
    Scigen
    SignaGen
    Technoclone
    ThermaGenix
    usp
    Signosis
    Silantes
    SkySpring Nanomaterials
    Solvo
    Sarstedt
    Ted Pella
    Stemcell
    DNA提取試劑盒
    Sigma
    Innovative Cell Technologies
    Merck Millipore
    Bio-Rad
    Frontier Specialty Chemicals
    TCI
    Firegen凡知醫療
    Takara

    【干貨】一文了解vero細胞培養全流程

    時間:2023/10/7閱讀:932
    分享:

    Vero細胞系是連續非整倍體細胞,連續細胞系可以經過多次分裂而不衰老,非整倍體是指細胞中的染色體數目與通常的不同。與其它普通哺乳動物細胞不同,Vero細胞還有干擾素分泌缺陷的特點,當被病毒感染時,它不能分泌干擾素,但它仍然具有α/β-干擾素的受體,所以對于其它來源的干擾素仍有正常的反應。

    一、基本信息

    細胞名稱:Vero非洲綠猴腎細胞

    細胞別稱:VERO; Verda reno

    細胞形態:上皮細胞樣

    生長特性:貼壁生長

    組織來源:正常腎

    培養基:MEM+10%FBS+1%PS

    生長條件:

    氣相:95%空氣+5%二氧化碳;

    溫度:37℃

    傳代方法:1:21:3,每周2-3次。

    二、培養指南

    1. Vero細胞復蘇步驟

    (1)1mL Vero細胞懸液凍存管于37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基進行混合均勻;

    (2)1000rpm條件下離心4min,棄上清液,再加入1-2mL培養基后輕輕吹打混勻;

    (3)Vero細胞懸液加入到含有適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入到6cm皿中,加入約4mL的培養基,培養過夜);

    (4)第二天換液并觀察Vero細胞密度。

    2. Vero細胞傳代步驟

    Vero細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

    (1)1mL Vero猴腎細胞懸液凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻;

    (2)1000rpm條件下離心4min,棄上清液,再加入1-2mL培養基后吹打混勻;

    (3)Vero猴腎細胞胞懸液加入到含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入到6cm皿中,加入約4mL培養基,培養過夜);

    (4)第二天換液并觀察Vero細胞密度。

    3. Vero細胞凍存步驟

    Vero細胞生長狀態良好,可進行細胞凍存。以T25瓶為例:

    (1)收集Vero細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,于1000rpm條件下離心4min,棄上清液,用PBS清洗一遍,棄掉PBS后進行細胞計數。

    (2)根據Vero細胞數量對應加入無血清細胞凍存液,使細胞密度在5×106~1×107/mL之間,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管上做好標識。

    (3)將凍存管放入-80℃冰箱中,24h后轉入液氮灌儲存。

    三、注意事項

    1. 培養基不能回收使用

    灌液培養基不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的wan全培養基來培養細胞。

    2. 細胞到貨處理說明

    (1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。

    (2)觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置2-4h

    (3)收到Vero細胞后第一次傳代建議1:2傳代,1:2傳代是指1T25瓶傳2T25瓶或者26cm皿,而不是1T25瓶傳210cm皿。

    四、常見問題

    1. vero細胞培養出現小黑點?

    處理方法:在細胞消化離心棄上清后,使用PBS重懸洗滌,在750rpm條件下低速離心4min,重新鋪下,然后鏡下觀察是否干凈。

    2. vero細胞生長過慢?

    (1)更換不同培養基或血清導致

    解決方法:分析新培養基與原培養基的成分,比較新血清與原血清支持細胞生長實驗,讓細胞逐漸適應新培養基。

    (2)有少量細菌或真菌污染

    解決方法:用含抗生素培養液培養,如發現污染,盡量丟棄培養物。

    (3)試劑保存不當導致

    解決方法:血清需要保存在-10-20℃

    培養基需在2-8℃避光保存;

    含血清wan全培養液在2-8℃保存。

    (4)接種細胞起始濃度太低

    解決方法:增加接種細胞起始濃度。

    (5)細胞已老化

    解決方法:引入新的保種細胞,重新培養。

    (6)支原體污染

    解決方法:吸取部分培養基,離心得上清,檢測支原體;

    清潔支架和培養箱;

    可在培養皿里加入支原體去除劑清除;

    如發現支原體污染,建議盡量丟棄。

    3. vero細胞培養過程中不貼壁?

    (1)yi酶消化過度導致

    解決方法:嘗試縮短yi酶消化時間或降低yi蛋白酶濃度。

    (2)支原體污染

    解決方法:吸取培養2-3的培養基,檢測支原體;

    清潔支架和培養箱;

     如發現支原體污染,丟棄培養物。

    (3)培養基pH值過堿(NaHCO3分解)

    解決方法:使用無菌醋酸溶液調整pH值或充入無菌CO2

    (4)細胞老化

    解決方法:購買新的代數較低的細胞。

    (5)接種細胞起始濃度太低或太高

    解決方法:調節最佳接種細胞濃度。

    4. vero細胞用什么培養基?

    vero細胞培養基:MEM+10%FBS+1%P/S

    5. vero細胞DMSO凍存比例?

    凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配或無血清細胞凍存液。

    更多有關vero細胞培養知識,請咨詢百奧創新客服。


    會員登錄

    ×

    請輸入賬號

    請輸入密碼

    =

    請輸驗證碼

    收藏該商鋪

    X
    該信息已收藏!
    標簽:
    保存成功

    (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

    常用:

    提示

    X
    您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
    撥打電話
    在線留言
    主站蜘蛛池模板: 成人美女黄网站视频大全| 成人一级黄色片| 成人性一级视频在线观看| 青青国产成人久久91网站站| 欧美成人精品第一区二区三区| 亚洲人成人77777网站| 欧美成人xxx| 成人性生交大片免费看午夜a| 国产成人亚洲精品蜜芽影院| 亚洲国产成人精品女人久久久 | 亚洲国产成人久久综合区| 一级成人生活片免费看| 成人免费在线视频| 国产成人手机高清在线观看网站| www国产成人免费观看视频| 国产激情一区二区三区成人91| 一级成人a毛片免费播放| 成人午夜高潮A∨猛片| 亚洲AV无码成人专区| 成人免费无码大片A毛片抽搐 | 久久亚洲色www成人欧美| 成人做受120秒试看动态图| 亚洲va在线va天堂成人| 国产成人无码AⅤ片在线观看| 成人精品一区二区三区校园激情| 五月天国产成人AV免费观看| 国产成人亚洲综合a∨| 国产精品成人99久久久久| 成人18视频日本| 成人毛片手机版免费看| 成人妇女免费播放久久久| 狠狠色伊人亚洲综合成人| 美国成人a免费毛片| 欧美成人精品a∨在线观看 | 欧美.成人.综合在线| 亚洲AV无码成人网站在线观看 | 91亚洲国产成人精品下载| 亚洲国产成人在线视频| 亚洲欧洲精品成人久久曰| 久久久久亚洲AV成人无码| 亚洲av成人综合网|