HCCLM3（人高轉移肝癌細胞）保存運輸 返回列表頁

產品名稱：HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸
英文名稱：HCCLM3(highly metastatic human hepatocellular carcinoma cell)
規格：5×105cells/瓶
產品貨號：FS-X0834
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的*培養基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得。
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸培養操作流程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備F-12K培養基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

KIT  人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ             96T
TGF- Beta1(Human Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit  人轉化生長因子β1             96T
HL ELISA Kit  大鼠肝脂酶             96T
Mouse trypsin ELISA Kit  小鼠*             96T
N-AChR ELISA Kit  大鼠煙堿型乙酰*受體             48T96T
TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha) ELISA Kit  人轉化生長因子α             96T
ODF(Mouse osteoclast differeiation factor) ELISA Kit  小鼠破骨細胞分化因子             96T
M-AChR ELISA Kit   大鼠毒蕈堿型乙酰*受體             96T
TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA kit  小鼠Toll樣受體9             96T
SDF-1 Beta/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit  人基質細胞衍生因子1β             96T
SCFR(Human Stem Cell Factor Receptor) ELISA kit  人干細胞因子受體             96T
Lep IgG(Mouse Leptospira IgG) ELISA Kit  小鼠鉤端螺旋體IgG             96T
APC ELISA Kit  大鼠活化蛋白C             96T
GAL ELISA Kit  大鼠甘丙肽/甘丙素             96T
GHRP-Ghrelin(Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit  小鼠生長激素釋放肽ghrelin             96T
SCF/MGF(Human Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit  人干細胞因子/肥大細胞生長因子             96T
sCD40L(Human Soluble Cluster of differeiation 40 ligand) ELISA Kit  人可溶性CD40配體             96T
vaspin(Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit  小鼠內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑             96T
a-Glu ELISA Kit  大鼠α葡萄糖苷酶             96T
ODF ELISA Kit  大鼠破骨細胞分化因子             96T
BrdU(Mouse Bromodeoxyuridine) ELISA Kit  小鼠溴脫氧核苷*             96T
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸sCD30L(Human Soluble Cluster of differeiation 30 ligand) ELISA Kit  人可溶性CD30配體             96T
RAES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA kit  人正常T細胞表達和分泌因子             96T
TGF Beta2(Mouse transforming growth factor Beta2) ELISA Kit  小鼠轉化生長因子β2             96T
TLR-9/CD289 ELISA kit   大鼠Toll樣受體9             96T
Lep IgG ISA Kit   大鼠鉤端螺旋體IgG             96T
Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit  小鼠α1微球蛋白             96T
P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140) ELISA kit  人P選擇素             96T