豬丙酮酸激酶M2型同工酶（PKM2）elisa定量檢測(cè)試劑盒原理 返回列表頁

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豬丙酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)elisa定量檢測(cè)試劑盒原理    英文名稱：    Porcine PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit    于測(cè)定血清、血漿、組織和相關(guān)液體樣本中的含量或者活性,規(guī)格96T/48T,存儲(chǔ)條件：2-8℃,有效期：6個(gè)月    產(chǎn)品別名：    豬丙酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)酶聯(lián)免疫試劑盒    96T/48T(兩種規(guī)格)。

豬丙酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)elisa定量檢測(cè)試劑盒原理操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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