小鼠 ELISA 檢測試劑盒操作及方案

                      小鼠 ELISA 檢測試劑盒操作及方案

  小鼠 ELISA試劑盒是夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）?公司的理念是：以誠信為本，努力打造品牌，為您提供的售中、售后服務。.已知小鼠 ELISA死因子濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。本公司的產品良好及服務。先將小鼠 ELISA和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中小鼠 ELISA子的濃度呈比例關系。

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入50ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

  標準品濃度（pg/ml）  

A 360 360 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

B 180 180 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

C 90 90 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

D 45 45 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

E 22.5 22.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

F 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

G 樣本 樣本 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品