人細胞周期素A1elisa定量檢測試劑盒的檢測原理和檢測前準備工作

人細胞周期素A1（CCNA1）elisa定量檢測試劑盒   檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人細胞周期素A1(CCNA1)單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的細胞周期素A1(CCNA1)會與單抗結(jié)合，游離的成份被洗去。加入酶標抗體，抗人細胞周期素A1(CCNA1)抗體與結(jié)合在單抗上的人細胞周期素A1(CCNA1)結(jié)合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有細胞周期素A1(CCNA1)，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450nm處測OD值，細胞周期素A1(CCNA1)濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中的細胞周期素A1(CCNA1)濃度。

人細胞周期素A1（CCNA1）elisa定量檢測試劑盒    檢測前準備工作:

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液（加熱溫度不要超過50℃，使用時洗滌液應(yīng)為室溫）。當日使用。

3. 標準品: 于10000×g離心1分鐘，加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中，旋緊管蓋，靜置10分鐘，上下顛倒數(shù)次，待其充分溶解后，用移液器將其輕輕混勻（濃度為10ng/mL。）。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋（注：不要直接在反應(yīng)孔中進行倍比稀釋）。建議配制成以下濃度：按照稀釋方法圖例 標準品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL標準品：取0.5mL10ng/mL的上述標準品加入含有0.5mL標準品&樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度依此類推。  

4. *化抗體工作液：實驗前計算當次實驗所需用量（以100μL/孔計），實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。

5. 酶結(jié)合物工作液：實驗前計算當次實驗所需用量（以100μL/孔計），實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘，以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。