大鼠載脂蛋白B（APOB）ELISA試劑盒操作程序和洗板方法

大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒操作程序：APOB試劑盒；大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒使用前請(qǐng)先將試劑盒在室溫下平衡半小時(shí)。
空白孔不加樣，只加顯色劑A，B和終止液用于調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)品孔：每孔加入稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品50μl，零孔加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液50μl，然后加入*抗原工作液50μl(零孔必須要做，并將其作為標(biāo)曲的后一個(gè)點(diǎn))。
樣品孔：加入樣品50μl（*直接加樣，濃度高可以用樣品稀釋液稀釋2-5倍），然后加入*抗原工作液50μl。
輕輕搖晃，蓋上封板膜，37℃培養(yǎng)箱中孵育30min。
將25倍濃縮洗滌液用蒸餾水25倍稀釋后備用。

g.       次洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

加入50μl親和素-HRP到標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中，輕輕搖晃，蓋上封板膜，37℃培養(yǎng)箱中孵育30min。

i.        第二次洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

j.        顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

k.       終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色).

l.        測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

m.     計(jì)算：APOB試劑盒；大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒根據(jù)濃度和OD值算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程，建議用計(jì)算軟件進(jìn)行計(jì)算，*使用ELISAcalc進(jìn)行計(jì)算，擬合模型選用logistic曲線（四參數(shù)）。

大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒洗板方法

a.手工洗板：先洗去酶標(biāo)孔中的的液體，在吸水紙上拍干，然后每孔加入300μl稀釋好的洗滌液，輕輕搖晃30秒，然后甩掉，在吸水紙上拍干，重復(fù)4-5次。

b.洗板機(jī)洗板：洗板機(jī)洗板比較便捷，但應(yīng)操作熟練后使用。