大鼠elisa定量檢測試劑盒實驗中的封閉液小知識

大鼠elisa定量檢測試劑盒實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點，蔗糖封閉的原理：
1、ELISA實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加，當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可)，0.4%的明膠，但是實驗表明前者比較好，后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上，結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了，不會影響實驗的準確度。
操作應當留意的安全事項：
1．防止直接觸摸停止液和底物A、B。一旦觸摸到這些液體，請趕快用水沖洗。
2、試驗中不要吃喝、抽煙或運用化妝品。
3．不要用嘴汲取試劑盒里的任何成份。
4．試劑應按標簽闡明書貯存，運用前康復到室溫。稀稀過后的規范品應丟掉，不行保存。
5．試驗中不必的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，防止蛻變。
6．不必的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前運用。
7．運用一次性的吸頭防止穿插污染，汲取停止液和底物A、B液時，防止運用帶金屬部分的加樣器。
8．運用潔凈的塑料容器配置洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9．洗刷酶標板時應充沛拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
10．底物A應蒸發，防止長時刻翻開蓋子。底物B對光靈敏，防止長時刻露出于光下。防止用手觸摸，有毒。試驗完成后應立即讀取OD值。
11．加入試劑的次序應共同，以確保一切反響板孔溫育的時刻一樣。
12．依照闡明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。
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