透明質酸（HA）elisa定量檢測試劑盒的操作步驟

透明質酸(HA)ELISA檢測試劑盒等撫生生物ELISA試劑盒間接法簡單操作步驟：

（1）、將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原；

（2）、加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗-體復合物；

（3）、加酶標抗抗體；

（4）、加入酶促反應底物，發生顯色反應，顯色的深淺與待測抗體的量成正比。

透明質酸(HA)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1、加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測樣品10µl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此

重復5次，拍干。

5、加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。

6、顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

10 分鐘.

7、終止：每孔加終止液50µl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。

8、測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。