大鼠載脂蛋白2B（ApoB）elisa試劑盒操作程序和準備工作

大鼠載脂蛋白2B（ApoB）elisa試劑盒操作程序

① 加抗體包被 → 4℃**，洗滌三次、拋干

② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘，加終止液

⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值

試劑準備

a.使用前所有試劑應置于室溫平衡至少30分鐘。

b.本試劑盒可以直接加樣，如濃度過高，可以進行適當比例的稀釋（推薦2-5倍稀釋），計算時應將結果乘以稀釋的倍數。

c.洗滌液為25倍濃縮液，使用前將所有洗滌液倒入500ml或1L的燒杯中，用雙蒸水定容到500ml即為工作液。

d.標準品的稀釋：先用標準品/樣品稀釋液將標準品凍干粉定容到150μl，然后漩渦混勻30秒即為標準品原液（24小時內用完）。APOB試劑盒；大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒取5支干凈的Eppendorf管，每管加150μl的標準品稀釋液，分別標記上160ng/L,80ng/L,40ng/L,20ng/L ,10ng/L .取150μl標準品原液加入標記160ng/L 的管中，混勻后同樣取出150μl，加入下一管，以此類推直至后一管。零孔：直接加標準品/樣品稀釋液。

e.*抗原的稀釋：抽取*抗原稀釋液1ml到濃縮型*抗原中，漩渦混勻15秒至凍干粉*溶解，然后將所有液體移入稀釋液瓶中,再次漩渦混勻30秒即為*抗原工作液。

f.親和素-HRP的稀釋：低速離心（使濃縮液全部沉到管底），將濃縮親和素-HRP全部移入相應稀釋液中然后漩渦混勻30秒即為親和素-HRP工作液