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    小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF圖片

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    更新時(shí)間:2017-09-11 08:54:26瀏覽次數(shù):114次

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    小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF圖片培養(yǎng)溫馨提示:
    1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
    2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
    3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
    4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

    細(xì)胞名稱  小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF圖片
    形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣
    生長特性  貼壁生長
    特征特性   取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養(yǎng)建立。該細(xì)胞可用作飼養(yǎng)層細(xì)胞,支持胚胎干細(xì)胞ES的生長并維持ES未分化的狀態(tài)。當(dāng)作為飼養(yǎng)層細(xì)胞時(shí),MEF需裂霉素C處理停止生長。建議作為ES細(xì)胞的飼養(yǎng)層時(shí),MEF不要超過6代。
    培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%CS
    傳代方法  1:3傳代;3~41次。 
    傳代情況  P1
    凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
    支原體檢測  培養(yǎng)法(- 
    STR   -
    同工酶

    染色體

    使用權(quán)限 A
    小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
    1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
    2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
    3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
    二、細(xì)胞處理:
    1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
    2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
    對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
    2)2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
    3)6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
    4)將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
    C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Complement Component 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

    間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物MSCGS

    B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)

    大鼠垂體瘤細(xì)胞;GH3 膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,T24細(xì)胞 MDBK (NBL-1)細(xì)胞,牛腎細(xì)胞

    HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系 Human

    LUM Others Human LUM / Lumican / LDC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
    非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37

    破骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

    GLIPR1 Others Mouse 小鼠 GLIPR1 / RTVP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

    Cyc-tAg細(xì)胞,小鼠T淋巴細(xì)胞瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染) 人卵巢癌*耐藥株,A2780/Taxol細(xì)胞 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞裂解物HPAFL

    狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1

    IGF1R Others Human IGF1R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
    間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物MSCGS

    C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Complement Component 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

    B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)

    大鼠垂體瘤細(xì)胞;GH3 膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,T24細(xì)胞 MDBK (NBL-1)細(xì)胞,牛腎細(xì)胞

    HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系 Human

    LUM Others Human LUM / Lumican / LDC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
    TRIS1.0MPH7.5STERILETris溶液超純級(jí)500MLRT

    8-Azaguanine 1vial/1vial*5 Sigma A5284

    D-GlutamineD-谷酸-5-酰胺5BR99%

    三基醋銫 98% Cqsium 2,2-dimqthylpropcnoctq, Cqsium trimqthylccqtctq 044-70-0

    2-脫氧胸苷-5-三嶙酸四鈉鹽shēng huà shì jì容量:RT1
    (本基基)本磺酸鋇鹽,英文名或英文縮寫:Barium dipxenylamine sulfonate,級(jí)別:BR,規(guī)格:1

    硅同 SE-30 SILICONq OV-1

    2,7-Diacetylfluorene 39665-89-9

    原花青素 proanthocyanidins (98%,HPLC) 4852-22-6 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

    DEAE葡聚糖凝膠A-50/DEAE Sephadex A-50 應(yīng)用:中等大小生物分子(30-200KD);載量3-4mmol/g 25100500 Pharmacia原裝
    小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF圖片苯正丁酯/苯丁酯/Butyl benzoate CP98.5% 500毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口

    DNAMarkershēng huà shì jì容量:25

    嘌呤;四氮雜茚;7-咪坐并(4,5-d)嘧啶 Purinq 10-73-0

    轉(zhuǎn)鐵蛋白/鐵傳遞蛋白/Transferrin human/TF/TRF BR98% 10毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口

    N,N-二異丙基 N,N-Diisopropylethylenediamine,97.0% 121-05-1 25ML 通用試劑

    小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF圖片質(zhì)量保證:
    我們的細(xì)胞株來源于ATCCECACCDSMZJCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
    細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

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