細胞凋亡檢測形態學檢測方法

根據細胞凋亡檢測固有的形態特征，人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。
1 光學顯微鏡和倒置顯微鏡
（1） 未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。
貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。
（2） 染色細胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質分割
成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。
2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡
一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。
常用的DNA特異性染料有：HO 33342 （Hoechst 33342），HO 33258 （Hoechst 33258）, DAPI。三種染料與DNA的結合是非嵌入式的，主要結合在DNA的A-T堿基區。紫外光激發時發射明亮的藍色熒光。
Hoechst是與DNA特異結合的活性染料，儲存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用時用PBS稀釋成終濃度為2~5mg/ml。
DAPI為半通透性，用于常規固定細胞的染色。儲存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用終濃度一般為0.5 ~1mg/ml。
結果評判：細胞凋亡檢測過程中細胞核染色質的形態學改變分為三期：Ⅰ期的細胞核呈波紋狀（rippled）或呈折縫樣（creased），部分染色質出現濃縮狀態；Ⅱa期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化；Ⅱb期的細胞核裂解為碎塊，產生凋亡。
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞；RBL-2H3
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)；PC-12(低分化)
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)；PC-12(高分化)
大鼠骨髓瘤細胞；Y3-Ag 1.2.3
大鼠骨肉瘤細胞；UMR-106
大鼠骨髓瘤細胞；Y3-Ag 1.2.3
大鼠骨肉瘤細胞；UMR-106
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞；PC-12 [PC12]
正常大鼠腎細胞；NRK
大鼠肝細胞瘤；H-4-II-E
大鼠腎小球系膜細胞；HBZY-1
細胞凋亡檢測